CAJ | 학술논문

采用疏水相互作用色谱(HIC)对还原变性核糖核酸酶A (RNase A)在疏水性液-固界面上的复性进行了研究.详细讨论了流动相中脲的浓度、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)的比例、流动相pH和变性蛋白质浓度对还原变性RNase A复性效率和质量回收率的影响.结果表明,在最优化的复性条件(流动相中含有2.0 mol/L 脲,GSH/GSSG的浓度比为8∶1,流动相pH为8.0)下,还原变性RNase A能完全复性.当变性蛋白质质量浓度为5.0 mg/mL 时,还原脲变性RNase A的活性回收率和质量回收率分别为98.0%和61.9% ,还原胍变性RNase A分别为100.1%和66.8% .研究表明HIC是还原变性蛋白质复性的有力工具之一,可为蛋白质复性研究提供新方法和新思路.
채용소수상호작용색보(HIC)대환원변성핵당핵산매A (RNase A)재소수성액-고계면상적복성진행료연구.상세토론료류동상중뇨적농도、환원형곡광감태/양화형곡광감태(GSH/GSSG)적비례、류동상pH화변성단백질농도대환원변성RNase A복성효솔화질량회수솔적영향.결과표명,재최우화적복성조건(류동상중함유2.0 mol/L 뇨,GSH/GSSG적농도비위8∶1,류동상pH위8.0)하,환원변성RNase A능완전복성.당변성단백질질량농도위5.0 mg/mL 시,환원뇨변성RNase A적활성회수솔화질량회수솔분별위98.0%화61.9% ,환원고변성RNase A분별위100.1%화66.8% .연구표명HIC시환원변성단백질복성적유력공구지일,가위단백질복성연구제공신방법화신사로.