泰山医学院学报
泰山醫學院學報
태산의학원학보
JOURNAL OF TAISHAN MEDICAL COLLEGE
2011年
3期
164-168
,共5页
赵刚%高静%郑晓菲%冯文静%赵俊杰%汪培华%涂玲
趙剛%高靜%鄭曉菲%馮文靜%趙俊傑%汪培華%塗玲
조강%고정%정효비%풍문정%조준걸%왕배화%도령
人组织型激肽释放酶%5/6肾脏切除%炎症%凋亡
人組織型激肽釋放酶%5/6腎髒切除%炎癥%凋亡
인조직형격태석방매%5/6신장절제%염증%조망
目的 探讨凋亡和炎症在人组织型激肽释放酶基因(human tissue kallirein,HK)肾脏保护中的作用和机制.方法 健康雄性Wistar大鼠32只,随机分为假手术组(sham)、手术组(operation),手术+绿色荧光蛋白(GFP)尾静脉注射组(GFP组)以及手术+人组织型激肽释放酶基因组(HK组).尾静脉注射病毒后3周,采取5/6肾切除术构建动物模型.术后第12周处死动物,肾组织石蜡切片行HE染色和Masson染色检测肾脏结构和胶原沉积.Tunnel染色和Caspase-3活性测定以检测凋亡细胞.Western blot技术检测肾组织Bcl-2、Bcl-xl、Bax、VCAM-1和MCP-1表达水平.结果 HE染色显示HK过表达明显抑制了5/6肾切除大鼠肾小管扩张和组织节段性硬化.Masson染色表明HK明显抑制了5/6肾切除大鼠肾脏胶原沉积(P<0.05).Tunnel染色和Caspase-3活性测定结果显示HK显著减少肾脏细胞的凋亡(P<0.05).Western blot显示HK明显降低了促凋亡蛋白Bax和炎症相关蛋白MCP-1和VCAM-1的表达,上调了凋亡抑制蛋白Bcl-2和Bcl-M的表达(P<0.05).结论 HK基因的肾脏保护作用至少部分是通过抑制细胞凋亡和炎症.机制至少包括下调促凋亡蛋白Bax和上调凋亡抑制蛋白Bcl-2和Bcl-xl的表达,抑制炎症相关蛋白MCP-1和VCAM-1的表达.
目的 探討凋亡和炎癥在人組織型激肽釋放酶基因(human tissue kallirein,HK)腎髒保護中的作用和機製.方法 健康雄性Wistar大鼠32隻,隨機分為假手術組(sham)、手術組(operation),手術+綠色熒光蛋白(GFP)尾靜脈註射組(GFP組)以及手術+人組織型激肽釋放酶基因組(HK組).尾靜脈註射病毒後3週,採取5/6腎切除術構建動物模型.術後第12週處死動物,腎組織石蠟切片行HE染色和Masson染色檢測腎髒結構和膠原沉積.Tunnel染色和Caspase-3活性測定以檢測凋亡細胞.Western blot技術檢測腎組織Bcl-2、Bcl-xl、Bax、VCAM-1和MCP-1錶達水平.結果 HE染色顯示HK過錶達明顯抑製瞭5/6腎切除大鼠腎小管擴張和組織節段性硬化.Masson染色錶明HK明顯抑製瞭5/6腎切除大鼠腎髒膠原沉積(P<0.05).Tunnel染色和Caspase-3活性測定結果顯示HK顯著減少腎髒細胞的凋亡(P<0.05).Western blot顯示HK明顯降低瞭促凋亡蛋白Bax和炎癥相關蛋白MCP-1和VCAM-1的錶達,上調瞭凋亡抑製蛋白Bcl-2和Bcl-M的錶達(P<0.05).結論 HK基因的腎髒保護作用至少部分是通過抑製細胞凋亡和炎癥.機製至少包括下調促凋亡蛋白Bax和上調凋亡抑製蛋白Bcl-2和Bcl-xl的錶達,抑製炎癥相關蛋白MCP-1和VCAM-1的錶達.
목적 탐토조망화염증재인조직형격태석방매기인(human tissue kallirein,HK)신장보호중적작용화궤제.방법 건강웅성Wistar대서32지,수궤분위가수술조(sham)、수술조(operation),수술+록색형광단백(GFP)미정맥주사조(GFP조)이급수술+인조직형격태석방매기인조(HK조).미정맥주사병독후3주,채취5/6신절제술구건동물모형.술후제12주처사동물,신조직석사절편행HE염색화Masson염색검측신장결구화효원침적.Tunnel염색화Caspase-3활성측정이검측조망세포.Western blot기술검측신조직Bcl-2、Bcl-xl、Bax、VCAM-1화MCP-1표체수평.결과 HE염색현시HK과표체명현억제료5/6신절제대서신소관확장화조직절단성경화.Masson염색표명HK명현억제료5/6신절제대서신장효원침적(P<0.05).Tunnel염색화Caspase-3활성측정결과현시HK현저감소신장세포적조망(P<0.05).Western blot현시HK명현강저료촉조망단백Bax화염증상관단백MCP-1화VCAM-1적표체,상조료조망억제단백Bcl-2화Bcl-M적표체(P<0.05).결론 HK기인적신장보호작용지소부분시통과억제세포조망화염증.궤제지소포괄하조촉조망단백Bax화상조조망억제단백Bcl-2화Bcl-xl적표체,억제염증상관단백MCP-1화VCAM-1적표체.