国际医学寄生虫病杂志
國際醫學寄生蟲病雜誌
국제의학기생충병잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF MEDICAL PARASITIC DISEASES
2010年
1期
25-28
,共4页
高红刚%付婷霞%全芯%李士根%谭文彬%郭永和
高紅剛%付婷霞%全芯%李士根%譚文彬%郭永和
고홍강%부정하%전심%리사근%담문빈%곽영화
微小隐孢子虫%卵囊%液氮保存
微小隱孢子蟲%卵囊%液氮保存
미소은포자충%란낭%액담보존
Cryptosporidium parvum%Oocyst%Liquid nitrogen preserve
目的 观察两种不同保存方法 对微小隐孢子虫卵囊感染小鼠能力的影响.方法 用PBS稀释纯化的卵囊,加入二甲基亚砜(DMSO),置-40℃ 3h后,放入液氮中保存;或加入2.5%重铬酸钾中,4℃保存.3个月后取出,观察它们的脱囊率;分别感染用地塞米松免疫抑制后的BALB/c小鼠,计数卵囊排出量,计算平均每克粪便中的卵囊数目,同时记录两组小鼠的死亡时间.分别采用t检验和成组设计的两样本秩和检验进行统计学分析.结果液氮中保存3个月的卵囊能够感染免疫抑制的BALB/c小鼠,其脱囊率为7.2%~49.6%、卵囊排出量为(4.7~7.3)×10~5/g,接种后实验小鼠死亡时间为124~351 h,与4℃保存的卵囊差别无统计学意义[8.3%~51.2%,(4.6~6.9)×10~5/g,132~348 h,P均>0.05)].结论 液氮中保存3个月的卵囊与4℃保存的卵囊对免疫抑制的小鼠具有同样的感染力,突破了微小隐孢子虫卵囊只能在4℃保存的传统观念,为隐孢子虫卵囊的长期保存提供了理论和实践依据.
目的 觀察兩種不同保存方法 對微小隱孢子蟲卵囊感染小鼠能力的影響.方法 用PBS稀釋純化的卵囊,加入二甲基亞砜(DMSO),置-40℃ 3h後,放入液氮中保存;或加入2.5%重鉻痠鉀中,4℃保存.3箇月後取齣,觀察它們的脫囊率;分彆感染用地塞米鬆免疫抑製後的BALB/c小鼠,計數卵囊排齣量,計算平均每剋糞便中的卵囊數目,同時記錄兩組小鼠的死亡時間.分彆採用t檢驗和成組設計的兩樣本秩和檢驗進行統計學分析.結果液氮中保存3箇月的卵囊能夠感染免疫抑製的BALB/c小鼠,其脫囊率為7.2%~49.6%、卵囊排齣量為(4.7~7.3)×10~5/g,接種後實驗小鼠死亡時間為124~351 h,與4℃保存的卵囊差彆無統計學意義[8.3%~51.2%,(4.6~6.9)×10~5/g,132~348 h,P均>0.05)].結論 液氮中保存3箇月的卵囊與4℃保存的卵囊對免疫抑製的小鼠具有同樣的感染力,突破瞭微小隱孢子蟲卵囊隻能在4℃保存的傳統觀唸,為隱孢子蟲卵囊的長期保存提供瞭理論和實踐依據.
목적 관찰량충불동보존방법 대미소은포자충란낭감염소서능력적영향.방법 용PBS희석순화적란낭,가입이갑기아풍(DMSO),치-40℃ 3h후,방입액담중보존;혹가입2.5%중락산갑중,4℃보존.3개월후취출,관찰타문적탈낭솔;분별감염용지새미송면역억제후적BALB/c소서,계수란낭배출량,계산평균매극분편중적란낭수목,동시기록량조소서적사망시간.분별채용t검험화성조설계적량양본질화검험진행통계학분석.결과액담중보존3개월적란낭능구감염면역억제적BALB/c소서,기탈낭솔위7.2%~49.6%、란낭배출량위(4.7~7.3)×10~5/g,접충후실험소서사망시간위124~351 h,여4℃보존적란낭차별무통계학의의[8.3%~51.2%,(4.6~6.9)×10~5/g,132~348 h,P균>0.05)].결론 액담중보존3개월적란낭여4℃보존적란낭대면역억제적소서구유동양적감염력,돌파료미소은포자충란낭지능재4℃보존적전통관념,위은포자충란낭적장기보존제공료이론화실천의거.
Objective To observe the infectivity of Cryptosporidium porvum oocysts preserved in two different ways.Methods Purified oocysts were stored at 4℃in 2.5%potassium dichromate or preserved in liquid nitrogen in the presence of cryoprotectant dimethyl sulfoxide(DMSO)for 3 months,then inoculated to BALB/c immuno-depressed mice respectively.The number of oocysts per gram feces and the survival time of infected mice after inoculation in two groups were analyzed by t test and rank sum test respectively.Results Both the purified oocysts kept in liquid nitrogen or stored at 4℃in 2.5%potassium dichromate exhibited infectivity to mice.There were no significant differences in two groups in terms of excystation rate(7.2%-49.6%,8.3%-51.2%),number of oocysts shedding[(4.7-7.3)×10~5/g,(4.6-6.9)×10~5/g)]and survival time of mice(124-351 h.132-348 h)after inoculation(P>0.05).Conclusions Both the oocysts kept in liquid hifor longer preservation period of oocysts.