中华检验医学杂志
中華檢驗醫學雜誌
중화검험의학잡지
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2005年
3期
310-312
,共3页
吴雪琼%梁建琴%曹立雪%李洪敏%张俊仙%陆阳
吳雪瓊%樑建琴%曹立雪%李洪敏%張俊仙%陸暘
오설경%량건금%조립설%리홍민%장준선%륙양
聚合酶链反应%寡核苷酸探针%分支杆菌,结核%基因
聚閤酶鏈反應%寡覈苷痠探針%分支桿菌,結覈%基因
취합매련반응%과핵감산탐침%분지간균,결핵%기인
目的应用聚合酶链反应(PCR)-寡核苷酸探针快速检测结核菌耐药基因突变,建立一种新的分子药敏试验方法.方法以传统药敏试验、PCR-单链构象多态性和PCR-直接测序方法为对照,对利福平、链霉素(SM)和乙胺丁醇耐药的结核菌基因rpoB、rpsL、rrs 和embB的寡核苷酸探针,通过反向斑点杂交检测78株结核菌临床分离株PCR产物.结果 18株结核菌药物敏感株的4种耐药基因均为野生型.60株结核菌耐药分离株中,59株为耐RFP株,rpoB基因突变率为93.2%,最常见的突变位点为531位和526位密码子,33株为耐SM株,rpsL基因突变率为75.8%,均为43位密码子AAG→AGG突变,rrs基因突变率为9.1%,均为513位A→C突变,rpsL和rrs基因总突变率为84.8%;43株为耐EMB株,embB基因突变率为58.1%,均为306位密码子突变.结论应用PCR-寡核苷酸探针反向斑点杂交技术可简便、快速、准确地分析大多数结核菌耐药基因突变,检测其耐药性.
目的應用聚閤酶鏈反應(PCR)-寡覈苷痠探針快速檢測結覈菌耐藥基因突變,建立一種新的分子藥敏試驗方法.方法以傳統藥敏試驗、PCR-單鏈構象多態性和PCR-直接測序方法為對照,對利福平、鏈黴素(SM)和乙胺丁醇耐藥的結覈菌基因rpoB、rpsL、rrs 和embB的寡覈苷痠探針,通過反嚮斑點雜交檢測78株結覈菌臨床分離株PCR產物.結果 18株結覈菌藥物敏感株的4種耐藥基因均為野生型.60株結覈菌耐藥分離株中,59株為耐RFP株,rpoB基因突變率為93.2%,最常見的突變位點為531位和526位密碼子,33株為耐SM株,rpsL基因突變率為75.8%,均為43位密碼子AAG→AGG突變,rrs基因突變率為9.1%,均為513位A→C突變,rpsL和rrs基因總突變率為84.8%;43株為耐EMB株,embB基因突變率為58.1%,均為306位密碼子突變.結論應用PCR-寡覈苷痠探針反嚮斑點雜交技術可簡便、快速、準確地分析大多數結覈菌耐藥基因突變,檢測其耐藥性.
목적응용취합매련반응(PCR)-과핵감산탐침쾌속검측결핵균내약기인돌변,건립일충신적분자약민시험방법.방법이전통약민시험、PCR-단련구상다태성화PCR-직접측서방법위대조,대리복평、련매소(SM)화을알정순내약적결핵균기인rpoB、rpsL、rrs 화embB적과핵감산탐침,통과반향반점잡교검측78주결핵균림상분리주PCR산물.결과 18주결핵균약물민감주적4충내약기인균위야생형.60주결핵균내약분리주중,59주위내RFP주,rpoB기인돌변솔위93.2%,최상견적돌변위점위531위화526위밀마자,33주위내SM주,rpsL기인돌변솔위75.8%,균위43위밀마자AAG→AGG돌변,rrs기인돌변솔위9.1%,균위513위A→C돌변,rpsL화rrs기인총돌변솔위84.8%;43주위내EMB주,embB기인돌변솔위58.1%,균위306위밀마자돌변.결론응용PCR-과핵감산탐침반향반점잡교기술가간편、쾌속、준학지분석대다수결핵균내약기인돌변,검측기내약성.