哈尔滨医科大学学报
哈爾濱醫科大學學報
합이빈의과대학학보
JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY
2004年
3期
215-217
,共3页
史从宁%吕凤祥%王天英%郭卓维%傅国辉
史從寧%呂鳳祥%王天英%郭卓維%傅國輝
사종저%려봉상%왕천영%곽탁유%부국휘
p16%GST融合基因表达系统%Westem blot
p16%GST融閤基因錶達繫統%Westem blot
p16%GST융합기인표체계통%Westem blot
目的利用GST融合基因表达系统表达、纯化及鉴定GST-p16融合蛋白.方法以质粒pM-p16为模板,扩增出p16基因片段,将其克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-6P-1,将所构建的重组质粒pGEX-p16转化大肠杆菌BL21并诱导表达,采用GST蛋白纯化系统进行纯化,所得产物进行SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果大肠杆菌细胞经诱导高效表达出约42kD蛋白,其分子量与GST-p16融合蛋白相符.Western blot结果显示该蛋白能够被p16抗体特异性识别.结论本实验在大肠杆菌表达系统中高效表达了有活性的GST-p16融合蛋白并可用于以后的实验研究.
目的利用GST融閤基因錶達繫統錶達、純化及鑒定GST-p16融閤蛋白.方法以質粒pM-p16為模闆,擴增齣p16基因片段,將其剋隆至大腸桿菌錶達載體pGEX-6P-1,將所構建的重組質粒pGEX-p16轉化大腸桿菌BL21併誘導錶達,採用GST蛋白純化繫統進行純化,所得產物進行SDS-PAGE及Western blot鑒定.結果大腸桿菌細胞經誘導高效錶達齣約42kD蛋白,其分子量與GST-p16融閤蛋白相符.Western blot結果顯示該蛋白能夠被p16抗體特異性識彆.結論本實驗在大腸桿菌錶達繫統中高效錶達瞭有活性的GST-p16融閤蛋白併可用于以後的實驗研究.
목적이용GST융합기인표체계통표체、순화급감정GST-p16융합단백.방법이질립pM-p16위모판,확증출p16기인편단,장기극륭지대장간균표체재체pGEX-6P-1,장소구건적중조질립pGEX-p16전화대장간균BL21병유도표체,채용GST단백순화계통진행순화,소득산물진행SDS-PAGE급Western blot감정.결과대장간균세포경유도고효표체출약42kD단백,기분자량여GST-p16융합단백상부.Western blot결과현시해단백능구피p16항체특이성식별.결론본실험재대장간균표체계통중고효표체료유활성적GST-p16융합단백병가용우이후적실험연구.
