中国公共卫生
中國公共衛生
중국공공위생
CHINA PUBLIC HEALTH
2004年
4期
400-402
,共3页
刘运喜%赵仲堂%高媛%张景兰%杨占清%步秀萍%苏静静
劉運喜%趙仲堂%高媛%張景蘭%楊佔清%步秀萍%囌靜靜
류운희%조중당%고원%장경란%양점청%보수평%소정정
聚合酶链反应/单链构象多态性分析(PCR/SSCP)%恙虫病东方体%基因型分析
聚閤酶鏈反應/單鏈構象多態性分析(PCR/SSCP)%恙蟲病東方體%基因型分析
취합매련반응/단련구상다태성분석(PCR/SSCP)%양충병동방체%기인형분석
目的采用优化聚合酶链反应/单链构象多态性分析(PCR/SSCP)方法分析恙虫病东方体(Orientia tsutsugamushi,Ot)基因型的各项条件.方法对恙虫病东方体山东分离株、小盾纤恙螨匀浆及恙虫病人全血中提取的Ot Sta56基因进行分析.采用PCR/SSCP检测,并与Nested PCR基因分型的结果进行比较.结果山东地区35份标本提取的Ot-DNA群引物扩增产物呈现出2种不同的单链构象图谱,其中33份与国际参考株Gilliam,Karp,Kato均不相同,应属这3型以外的一种基因型,经Nested PCR分型证实为Kawasaki型;2份与Karp株相同.表明山东地区恙虫病东方体至少存在2种型别.检测结果与Nested-PCR基因分型结果相符.条件优化以8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,常温下,200V电泳3 h获得的电泳结果较为理想,并易于操作.结论PCR/SSCP条件优化后可用于快速分析恙虫病东方体基因型,且操作简便,结果准确.
目的採用優化聚閤酶鏈反應/單鏈構象多態性分析(PCR/SSCP)方法分析恙蟲病東方體(Orientia tsutsugamushi,Ot)基因型的各項條件.方法對恙蟲病東方體山東分離株、小盾纖恙螨勻漿及恙蟲病人全血中提取的Ot Sta56基因進行分析.採用PCR/SSCP檢測,併與Nested PCR基因分型的結果進行比較.結果山東地區35份標本提取的Ot-DNA群引物擴增產物呈現齣2種不同的單鏈構象圖譜,其中33份與國際參攷株Gilliam,Karp,Kato均不相同,應屬這3型以外的一種基因型,經Nested PCR分型證實為Kawasaki型;2份與Karp株相同.錶明山東地區恙蟲病東方體至少存在2種型彆.檢測結果與Nested-PCR基因分型結果相符.條件優化以8%的非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳,常溫下,200V電泳3 h穫得的電泳結果較為理想,併易于操作.結論PCR/SSCP條件優化後可用于快速分析恙蟲病東方體基因型,且操作簡便,結果準確.
목적채용우화취합매련반응/단련구상다태성분석(PCR/SSCP)방법분석양충병동방체(Orientia tsutsugamushi,Ot)기인형적각항조건.방법대양충병동방체산동분리주、소순섬양만균장급양충병인전혈중제취적Ot Sta56기인진행분석.채용PCR/SSCP검측,병여Nested PCR기인분형적결과진행비교.결과산동지구35빈표본제취적Ot-DNA군인물확증산물정현출2충불동적단련구상도보,기중33빈여국제삼고주Gilliam,Karp,Kato균불상동,응속저3형이외적일충기인형,경Nested PCR분형증실위Kawasaki형;2빈여Karp주상동.표명산동지구양충병동방체지소존재2충형별.검측결과여Nested-PCR기인분형결과상부.조건우화이8%적비변성취병희선알응효전영,상온하,200V전영3 h획득적전영결과교위이상,병역우조작.결론PCR/SSCP조건우화후가용우쾌속분석양충병동방체기인형,차조작간편,결과준학.
