CAJ | 학술논문

分别从DNA和蛋白质2个水平上对转基因耐除草剂大豆及其产品的检测方法进行了研究. 设计合成引物检测大豆内参照基因Lectin(大豆凝集素)及转基因抗除草剂Roundup Ready大豆外源基因,包括来自土壤细菌Agrobacterium tumefaciens株系CP4的5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶(5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase,EPSPS)基因、花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus,CaMV)35S启动子、胭脂碱合酶3′端的转录终止子(nopaline synthase,NOS). 应用优化的常规PCR方法,对大豆及其加工产品进行了检测,检测灵敏度可达0.1%. 通过PCR方法从转基因大豆中扩增出CP4-EPSPS基因,在大肠杆菌中表达,利用表达的外源蛋白质作为抗原免疫家兔,得到该蛋白质的多克隆抗体,并建立了一套基于蛋白质印迹杂交(western hybridization)的检测转基因大豆及其粗加工品的方法,其检测极限达到1%以下. 此两方法互相配合,互相印证,有助于规范化转基因检测方法的建立.
분별종DNA화단백질2개수평상대전기인내제초제대두급기산품적검측방법진행료연구. 설계합성인물검측대두내삼조기인Lectin(대두응집소)급전기인항제초제Roundup Ready대두외원기인,포괄래자토양세균Agrobacterium tumefaciens주계CP4적5-희순병동산망초산-3-린산합매(5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase,EPSPS)기인、화야채화협병독(Cauliflower mosaic virus,CaMV)35S계동자、연지감합매3′단적전록종지자(nopaline synthase,NOS). 응용우화적상규PCR방법,대대두급기가공산품진행료검측,검측령민도가체0.1%. 통과PCR방법종전기인대두중확증출CP4-EPSPS기인,재대장간균중표체,이용표체적외원단백질작위항원면역가토,득도해단백질적다극륭항체,병건립료일투기우단백질인적잡교(western hybridization)적검측전기인대두급기조가공품적방법,기검측겁한체도1%이하. 차량방법호상배합,호상인증,유조우규범화전기인검측방법적건립.