CAJ | 학술논문

目的:探讨氯氮平对雄性C57BL/6小鼠胰腺β细胞凋亡的影响.方法:实验于2004-03/09在南京医科大学第一附属医院中心实验室完成.选择清洁级雄性C57BL/6小鼠63只,体质量(20±2)g,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供[许可证号:SCXK(沪)2003-0003].随机分为空白组21只、氯氮平4mg/kg组21只、氯氮平20mg/kg组21只,各组小鼠的体质量和基础血糖值无显著差异(P＞0.05).所有动物每7只分笼饲养于光照12 h(7 Am～7 Pm),相对湿度45%的普通设施中,普通全价鼠饲料喂养,自由进食及饮水.①模型制作:氯氮平充分研磨后加入蒸馏水,配成浓度为2g/L和0.4g/L的悬浊液,灌胃前充分摇匀.氯氮平4 mg/kg组灌胃0.4g/L的悬浊液0.2 mL,氯氮平20 mg/kg组灌胃2g/L的悬浊液0.2mL,空白组灌胃同样剂量的蒸馏水.按发病不同时间每组再分为3组,各7只,超急性期组灌胃1次;急性期组灌胃1次/d,共7次;慢性期组灌胃1次/d,共28次.②标本的处理:禁食12 h(8 Pm～8 Am)后,超急性期组在第1次灌胃后3 h,急性期组(1周)和慢性期组(4周)灌胃1次/d,最后一次灌胃后3 h,摘眼球取血后颈椎脱臼处死小鼠,立即取小鼠的胰腺置体积分数为0.1的中性甲醛液中固定24 h,常规制作石蜡切片,厚4μm.采用苏木精-伊红染色,光镜下观察胰岛炎的情况.应用原位末端转移酶标记法染凋亡细胞,用链霉亲合素-生物素化过氧化物酶复合物免疫组织化学法染β细胞,进行β细胞凋亡计数.结果:纳入动物63只,均进入结果分析.①苏木精-伊红染色显微镜观察显示:空白对照组、氯氮平4mg/kg组、氯氮平20mg/kg组小鼠胰岛均位于胰腺外分泌部之中,其岛形丰满,轮廓清晰,胰岛细胞分布均匀,均未见淋巴细胞浸润.②免疫组织化学染色显微镜观察显示:空白对照组、氯氮平4mg/kg组、氯氮平20 mg/kg组小鼠胰岛轮廓清晰,胰岛细胞分布均匀,内外分泌部界限清楚,大量的β细胞胞浆呈棕黄色的胰岛素阳性表达,未见β细胞凋亡,可见少量散在的胰腺腺泡细胞凋亡.结论:氯氮平对胰腺β细胞没有明显的毒害作用,不诱导β细胞的凋亡. 目的:探討氯氮平對雄性C57BL/6小鼠胰腺β細胞凋亡的影響.方法:實驗于2004-03/09在南京醫科大學第一附屬醫院中心實驗室完成.選擇清潔級雄性C57BL/6小鼠63隻,體質量(20±2)g,由上海斯萊剋實驗動物有限責任公司提供[許可證號:SCXK(滬)2003-0003].隨機分為空白組21隻、氯氮平4mg/kg組21隻、氯氮平20mg/kg組21隻,各組小鼠的體質量和基礎血糖值無顯著差異(P＞0.05).所有動物每7隻分籠飼養于光照12 h(7 Am～7 Pm),相對濕度45%的普通設施中,普通全價鼠飼料餵養,自由進食及飲水.①模型製作:氯氮平充分研磨後加入蒸餾水,配成濃度為2g/L和0.4g/L的懸濁液,灌胃前充分搖勻.氯氮平4 mg/kg組灌胃0.4g/L的懸濁液0.2 mL,氯氮平20 mg/kg組灌胃2g/L的懸濁液0.2mL,空白組灌胃同樣劑量的蒸餾水.按髮病不同時間每組再分為3組,各7隻,超急性期組灌胃1次;急性期組灌胃1次/d,共7次;慢性期組灌胃1次/d,共28次.②標本的處理:禁食12 h(8 Pm～8 Am)後,超急性期組在第1次灌胃後3 h,急性期組(1週)和慢性期組(4週)灌胃1次/d,最後一次灌胃後3 h,摘眼毬取血後頸椎脫臼處死小鼠,立即取小鼠的胰腺置體積分數為0.1的中性甲醛液中固定24 h,常規製作石蠟切片,厚4μm.採用囌木精-伊紅染色,光鏡下觀察胰島炎的情況.應用原位末耑轉移酶標記法染凋亡細胞,用鏈黴親閤素-生物素化過氧化物酶複閤物免疫組織化學法染β細胞,進行β細胞凋亡計數.結果:納入動物63隻,均進入結果分析.①囌木精-伊紅染色顯微鏡觀察顯示:空白對照組、氯氮平4mg/kg組、氯氮平20mg/kg組小鼠胰島均位于胰腺外分泌部之中,其島形豐滿,輪廓清晰,胰島細胞分佈均勻,均未見淋巴細胞浸潤.②免疫組織化學染色顯微鏡觀察顯示:空白對照組、氯氮平4mg/kg組、氯氮平20 mg/kg組小鼠胰島輪廓清晰,胰島細胞分佈均勻,內外分泌部界限清楚,大量的β細胞胞漿呈棕黃色的胰島素暘性錶達,未見β細胞凋亡,可見少量散在的胰腺腺泡細胞凋亡.結論:氯氮平對胰腺β細胞沒有明顯的毒害作用,不誘導β細胞的凋亡.
목적:탐토록담평대웅성C57BL/6소서이선β세포조망적영향.방법:실험우2004-03/09재남경의과대학제일부속의원중심실험실완성.선택청길급웅성C57BL/6소서63지,체질량(20±2)g,유상해사래극실험동물유한책임공사제공[허가증호:SCXK(호)2003-0003].수궤분위공백조21지、록담평4mg/kg조21지、록담평20mg/kg조21지,각조소서적체질량화기출혈당치무현저차이(P＞0.05).소유동물매7지분롱사양우광조12 h(7 Am～7 Pm),상대습도45%적보통설시중,보통전개서사료위양,자유진식급음수.①모형제작:록담평충분연마후가입증류수,배성농도위2g/L화0.4g/L적현탁액,관위전충분요균.록담평4 mg/kg조관위0.4g/L적현탁액0.2 mL,록담평20 mg/kg조관위2g/L적현탁액0.2mL,공백조관위동양제량적증류수.안발병불동시간매조재분위3조,각7지,초급성기조관위1차;급성기조관위1차/d,공7차;만성기조관위1차/d,공28차.②표본적처리:금식12 h(8 Pm～8 Am)후,초급성기조재제1차관위후3 h,급성기조(1주)화만성기조(4주)관위1차/d,최후일차관위후3 h,적안구취혈후경추탈구처사소서,립즉취소서적이선치체적분수위0.1적중성갑철액중고정24 h,상규제작석사절편,후4μm.채용소목정-이홍염색,광경하관찰이도염적정황.응용원위말단전이매표기법염조망세포,용련매친합소-생물소화과양화물매복합물면역조직화학법염β세포,진행β세포조망계수.결과:납입동물63지,균진입결과분석.①소목정-이홍염색현미경관찰현시:공백대조조、록담평4mg/kg조、록담평20mg/kg조소서이도균위우이선외분비부지중,기도형봉만,륜곽청석,이도세포분포균균,균미견림파세포침윤.②면역조직화학염색현미경관찰현시:공백대조조、록담평4mg/kg조、록담평20 mg/kg조소서이도륜곽청석,이도세포분포균균,내외분비부계한청초,대량적β세포포장정종황색적이도소양성표체,미견β세포조망,가견소량산재적이선선포세포조망.결론:록담평대이선β세포몰유명현적독해작용,불유도β세포적조망.