CAJ | 학술논문

在优化花培诱导培养基成分的基础上,通过延长花药愈伤组织在诱导培养基上培养的时间和降低共培养过程中农杆菌浓度等,成功地建立了以花药愈伤组织为受体的农杆菌转化体系.并将白叶枯菌抗性基因Xa21作为该体系的模式基因导入到多个粳稻品种的花药愈伤组织中,共得到了145个独立的转基因株系.分子检测和田间抗性检测发现其中的140个株系的基因组含有外源的Xa21基因,包括单倍体45株、二倍体87株和混倍体植株8株.根据后代性状分离比和染色体的FISH分析可以确定,在87个二倍体植株中有15株为纯合的加倍单倍体转基因植株;再加上田间自然加倍和由秋水仙碱处理单倍体所获得的28株加倍单倍体,共得到了43个纯合的加倍单倍体转基因株系.还将该转化体系用于反向遗传学的研究.一个在植物体内能转录产生双链RNA(double strand RNA,dsRNA)发夹结构的质粒pZ2RNAi被导入到水稻单倍体基因组中,该dsRNA的靶目标是水稻的OsMADS2基因的转录物,结果表明,在转pZ2RNAi的单倍体水稻中,靶基因OsMADS2的表达被特异地抑制,并导致花器官形态的明显改变.因此,单倍体转化体系与RNAi技术相结合有可能成为在水稻和其他植物中功能基因组研究的一个新途径.
재우화화배유도배양기성분적기출상,통과연장화약유상조직재유도배양기상배양적시간화강저공배양과정중농간균농도등,성공지건립료이화약유상조직위수체적농간균전화체계.병장백협고균항성기인Xa21작위해체계적모식기인도입도다개갱도품충적화약유상조직중,공득도료145개독립적전기인주계.분자검측화전간항성검측발현기중적140개주계적기인조함유외원적Xa21기인,포괄단배체45주、이배체87주화혼배체식주8주.근거후대성상분리비화염색체적FISH분석가이학정,재87개이배체식주중유15주위순합적가배단배체전기인식주;재가상전간자연가배화유추수선감처리단배체소획득적28주가배단배체,공득도료43개순합적가배단배체전기인주계.환장해전화체계용우반향유전학적연구.일개재식물체내능전록산생쌍련RNA(double strand RNA,dsRNA)발협결구적질립pZ2RNAi피도입도수도단배체기인조중,해dsRNA적파목표시수도적OsMADS2기인적전록물,결과표명,재전pZ2RNAi적단배체수도중,파기인OsMADS2적표체피특이지억제,병도치화기관형태적명현개변.인차,단배체전화체계여RNAi기술상결합유가능성위재수도화기타식물중공능기인조연구적일개신도경.