第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2008年
13期
1219-1222
,共4页
黄宏%朱方强%孙宏振%冯帅南%王正国%朱佩芳%张波
黃宏%硃方彊%孫宏振%馮帥南%王正國%硃珮芳%張波
황굉%주방강%손굉진%풍수남%왕정국%주패방%장파
干细胞%脂肪组织%脂肪来源干细胞%脂肪细胞%成骨细胞%细胞分化
榦細胞%脂肪組織%脂肪來源榦細胞%脂肪細胞%成骨細胞%細胞分化
간세포%지방조직%지방래원간세포%지방세포%성골세포%세포분화
目的 探讨脂肪组织来源的多能干细胞(adipose tissue-derived stromal ceHs,ADSCs)的多向分化潜能.方法 取小香猪腹部皮下脂肪组织,通过Ⅰ型胶原酶消化、离心等步骤分离培养ADSCs,经过原代培养和传代培养.分别加入成骨诱导剂和成脂诱导培养.经过倒置显微镜观察诱导后细胞形态变化,并通过Gomori改良钙钴法、yon Kossa染色和油红O染色对其成骨细胞和脂肪细胞表型进行鉴定,进一步比较细胞的转化率.结果 ADSCs呈成纤维细胞样贴壁生长,其经成骨、成脂诱导培养2周后形态、体积发生明显改变.Gomori改良钙钴法染色显示其细胞质内富含碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)颗粒,诱导后15 d和19 d,ALP阳性细胞分别为(25.0±7.5)%和(49.7±6.9)%,von Kossa染色表明聚集的细胞团中央能形成钙化结节;倒置显微镜,成脂诱导3、7、14 d后脂肪细胞转化率分别为(22.3±12.5)%、(49.6±7.1)%和(89.4±9.3)%.油红O染色可见细胞质内出现橙红色脂滴,14 d油红O染色阳性率高达(92.5±9.1)%.结论 ADSCs经体外诱导培养后可向成骨细胞和脂肪细胞分化,并具有明显的成骨和成脂表型,表明ADSCs具有多向分化潜能.
目的 探討脂肪組織來源的多能榦細胞(adipose tissue-derived stromal ceHs,ADSCs)的多嚮分化潛能.方法 取小香豬腹部皮下脂肪組織,通過Ⅰ型膠原酶消化、離心等步驟分離培養ADSCs,經過原代培養和傳代培養.分彆加入成骨誘導劑和成脂誘導培養.經過倒置顯微鏡觀察誘導後細胞形態變化,併通過Gomori改良鈣鈷法、yon Kossa染色和油紅O染色對其成骨細胞和脂肪細胞錶型進行鑒定,進一步比較細胞的轉化率.結果 ADSCs呈成纖維細胞樣貼壁生長,其經成骨、成脂誘導培養2週後形態、體積髮生明顯改變.Gomori改良鈣鈷法染色顯示其細胞質內富含堿性燐痠酶(alkalinephosphatase,ALP)顆粒,誘導後15 d和19 d,ALP暘性細胞分彆為(25.0±7.5)%和(49.7±6.9)%,von Kossa染色錶明聚集的細胞糰中央能形成鈣化結節;倒置顯微鏡,成脂誘導3、7、14 d後脂肪細胞轉化率分彆為(22.3±12.5)%、(49.6±7.1)%和(89.4±9.3)%.油紅O染色可見細胞質內齣現橙紅色脂滴,14 d油紅O染色暘性率高達(92.5±9.1)%.結論 ADSCs經體外誘導培養後可嚮成骨細胞和脂肪細胞分化,併具有明顯的成骨和成脂錶型,錶明ADSCs具有多嚮分化潛能.
목적 탐토지방조직래원적다능간세포(adipose tissue-derived stromal ceHs,ADSCs)적다향분화잠능.방법 취소향저복부피하지방조직,통과Ⅰ형효원매소화、리심등보취분리배양ADSCs,경과원대배양화전대배양.분별가입성골유도제화성지유도배양.경과도치현미경관찰유도후세포형태변화,병통과Gomori개량개고법、yon Kossa염색화유홍O염색대기성골세포화지방세포표형진행감정,진일보비교세포적전화솔.결과 ADSCs정성섬유세포양첩벽생장,기경성골、성지유도배양2주후형태、체적발생명현개변.Gomori개량개고법염색현시기세포질내부함감성린산매(alkalinephosphatase,ALP)과립,유도후15 d화19 d,ALP양성세포분별위(25.0±7.5)%화(49.7±6.9)%,von Kossa염색표명취집적세포단중앙능형성개화결절;도치현미경,성지유도3、7、14 d후지방세포전화솔분별위(22.3±12.5)%、(49.6±7.1)%화(89.4±9.3)%.유홍O염색가견세포질내출현등홍색지적,14 d유홍O염색양성솔고체(92.5±9.1)%.결론 ADSCs경체외유도배양후가향성골세포화지방세포분화,병구유명현적성골화성지표형,표명ADSCs구유다향분화잠능.
