猪繁殖与呼吸综合征病毒Hn-1/06株GP3蛋白的原核表达与纯化
저번식여호흡종합정병독Hn-1/06주GP3단백적원핵표체여순화
Prokaryotic Expression of GP3 Protein of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Hn-1/06 Strain
  • 万方数据
    华北农学报 화북농학보
    ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
    2009年 1期 103-107 ,共5页

    王中明%李素平%夏平安%尹彦涛%李伟娟%邱璜%刘明莉%刘玉松%崔保安

    왕중명%리소평%하평안%윤언도%리위연%구황%류명리%류옥송%최보안

    PRRSV%GP3蛋白%原核表达 PRRSV%GP3蛋白%原覈錶達
    PRRSV%GP3단백%원핵표체
    根据GenBank中PRRSV美洲株ATCC VR2332的ORF3基因序列,利用Primer 5.0软件设计合成了1对特异性引物,经RT-PCR从河南分离株Hn-1/06株扩增得到了大小为765 bp的片段,并将扩增的片段插入pTG19-T载体进行测序而获得含有ORF3的阳性克隆pTG19-T-GP3.将此基因亚克隆到原核表达载体pET-32a,经筛选获得了阳性重组质粒pET-GP3,进而在IPTG的诱导下成功表达,获得了大小约为45 kDa的融合蛋白GP3-His,纯化后经Western blot检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性.从而为进一步研究PRRSV次要结构蛋白GP3的免疫特性和功能奠定了基础.
    근거GenBank중PRRSV미주주ATCC VR2332적ORF3기인서렬,이용Primer 5.0연건설계합성료1대특이성인물,경RT-PCR종하남분리주Hn-1/06주확증득도료대소위765 bp적편단,병장확증적편단삽입pTG19-T재체진행측서이획득함유ORF3적양성극륭pTG19-T-GP3.장차기인아극륭도원핵표체재체pET-32a,경사선획득료양성중조질립pET-GP3,진이재IPTG적유도하성공표체,획득료대소약위45 kDa적융합단백GP3-His,순화후경Western blot검측증실표체적융합단백구유량호적생물학활성.종이위진일보연구PRRSV차요결구단백GP3적면역특성화공능전정료기출.
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