天津农学院学报
天津農學院學報
천진농학원학보
JOURNAL OF TIANJIN AGRICULTURAL COLLEGE
2009年
3期
1-4
,共4页
杨建德%刘燕霏%李本强%徐军
楊建德%劉燕霏%李本彊%徐軍
양건덕%류연비%리본강%서군
猪胸膜肺炎放线杆菌%外膜蛋白基因%克隆与表达%酶联免疫吸附试验
豬胸膜肺炎放線桿菌%外膜蛋白基因%剋隆與錶達%酶聯免疫吸附試驗
저흉막폐염방선간균%외막단백기인%극륭여표체%매련면역흡부시험
猪传染性胸膜肺炎由猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起,是猪最重要的呼吸道传染病之一.通过筛选APP 3～8 kb随机基因组文库,获得1株阳性克隆.测序拯救质粒得到其DNA序列,通过BLAST分析确定此片段为APP外膜蛋白基因,预计成熟蛋白质的分子量为48.766 kD.根据序列设计特异性引物,用PCR扩增该基因,分子克隆表达该外膜蛋白.Western blot结果表明,该蛋白与APP康复期血清发生反应.纯化该重组蛋白,并将其作为抗原包被ELISA酶标板,对已知阳性血清、阴性血清和临床送检血清样品进行ELISA检测,为最终建立APPELISA检测方法奠定了基础.
豬傳染性胸膜肺炎由豬胸膜肺炎放線桿菌(APP)引起,是豬最重要的呼吸道傳染病之一.通過篩選APP 3～8 kb隨機基因組文庫,穫得1株暘性剋隆.測序拯救質粒得到其DNA序列,通過BLAST分析確定此片段為APP外膜蛋白基因,預計成熟蛋白質的分子量為48.766 kD.根據序列設計特異性引物,用PCR擴增該基因,分子剋隆錶達該外膜蛋白.Western blot結果錶明,該蛋白與APP康複期血清髮生反應.純化該重組蛋白,併將其作為抗原包被ELISA酶標闆,對已知暘性血清、陰性血清和臨床送檢血清樣品進行ELISA檢測,為最終建立APPELISA檢測方法奠定瞭基礎.
저전염성흉막폐염유저흉막폐염방선간균(APP)인기,시저최중요적호흡도전염병지일.통과사선APP 3～8 kb수궤기인조문고,획득1주양성극륭.측서증구질립득도기DNA서렬,통과BLAST분석학정차편단위APP외막단백기인,예계성숙단백질적분자량위48.766 kD.근거서렬설계특이성인물,용PCR확증해기인,분자극륭표체해외막단백.Western blot결과표명,해단백여APP강복기혈청발생반응.순화해중조단백,병장기작위항원포피ELISA매표판,대이지양성혈청、음성혈청화림상송검혈청양품진행ELISA검측,위최종건립APPELISA검측방법전정료기출.
