湖北农业科学
湖北農業科學
호북농업과학
2009年
11期
2804-2807
,共4页
杨帆%姚琪%刁英%郑兴飞%胡中立%舒新亚
楊帆%姚琪%刁英%鄭興飛%鬍中立%舒新亞
양범%요기%조영%정흥비%호중립%서신아
克氏原螯虾(Procambarus clarkii)%AFLP%反应体系
剋氏原螯蝦(Procambarus clarkii)%AFLP%反應體繫
극씨원오하(Procambarus clarkii)%AFLP%반응체계
Procambarus clarkii%AFLP%reaction system
以克氏原螯虾DNA为材料,对AFLP分析中的基因组酶切时间、选择性扩增中预扩增产物稀释倍数、Mg~(2+)浓度等3个因素进行了比较.结果表明,基因组用EcoR I和MseI双酶切5h,选择性扩增的PCR反应体系中Mg~(2+)1.5 mmol/L是进行克氏原螯虾AFLP分析的最佳反应条件,能够得到丰富稳定的带纹.而预扩增产物稀释倍数对选择性扩增没有明显影响.该体系的构建为AFLP技术在克氏原螯虾相关研究中的应用奠定了基础.
以剋氏原螯蝦DNA為材料,對AFLP分析中的基因組酶切時間、選擇性擴增中預擴增產物稀釋倍數、Mg~(2+)濃度等3箇因素進行瞭比較.結果錶明,基因組用EcoR I和MseI雙酶切5h,選擇性擴增的PCR反應體繫中Mg~(2+)1.5 mmol/L是進行剋氏原螯蝦AFLP分析的最佳反應條件,能夠得到豐富穩定的帶紋.而預擴增產物稀釋倍數對選擇性擴增沒有明顯影響.該體繫的構建為AFLP技術在剋氏原螯蝦相關研究中的應用奠定瞭基礎.
이극씨원오하DNA위재료,대AFLP분석중적기인조매절시간、선택성확증중예확증산물희석배수、Mg~(2+)농도등3개인소진행료비교.결과표명,기인조용EcoR I화MseI쌍매절5h,선택성확증적PCR반응체계중Mg~(2+)1.5 mmol/L시진행극씨원오하AFLP분석적최가반응조건,능구득도봉부은정적대문.이예확증산물희석배수대선택성확증몰유명현영향.해체계적구건위AFLP기술재극씨원오하상관연구중적응용전정료기출.
By using genomic DNA of Procambarus clarkii, the time for DNA double enzymes digestion reaction,the dilution multiple for the pre-amplification production and the concentration of Mg~(2+ )in the selective amplification reactions system were analyzed. The results showed using 5h for double enzymes digestion and Mg~(2+) 1.5 mmol/L were the best for AFLP analysis of P. clarkii. And no change was found when adjusting the dilution multiple for the pre-amplification production. The establishment of the system might lay a foundation for the application of AFLP techniques to the relative research of P. clarkii.