生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2011年
1期
28-31,44
,共5页
吴永红%何国维%高艳%张成岗
吳永紅%何國維%高豔%張成崗
오영홍%하국유%고염%장성강
重组人源脑红蛋白%双抗夹心%酶联免疫吸附检测
重組人源腦紅蛋白%雙抗夾心%酶聯免疫吸附檢測
중조인원뇌홍단백%쌍항협심%매련면역흡부검측
目的:利用ELISA技术研发一种灵敏、快速检测人血清中脑红蛋白(Ngb)含量的检测试剂盒,并探讨其在正常人血清样本检测中的应用.方法:采用热诱导的原核表达体系获得重组人源脑红蛋白(rhNgb),通过凝胶过滤和阴离子交换层析等制备rhNgb纯品;将适量rhNgb纯品免疫动物获得抗rhNgb单克隆抗体和多克隆抗体;用双抗体夹心ELISA技术制备rhNgb-ELISA检测试剂盒;用该试剂盒对410例正常人血清中Ngb的含量进行检测,其中包括1.5岁以下婴儿血清55例、19-70岁成人血清355例.结果:用制备的rhNgb-ELISA试剂盒检测发现Ngb在正常人血清中的分布与年龄存在明显的相关性,表现为"两头高、中间低"的趋势,耍儿和老年人血清中Ngb的含量分别为1.6708±0.4945和2.1962±0.6703 μmol/L,而中年人血清中Ngb的含量为0.3622±0.0716 μmol/L.结论:采用双抗夹心EUSA技术并结合严格的质量控制,研发了高效灵敏的rhNgb-ELISA检测试剂盒,并初步获得了正常人血清中NGb的含量分布情况,为临床缺血及缺氧性脑损伤等相关疾病的辅助诊断治疗提供了参考信息.
目的:利用ELISA技術研髮一種靈敏、快速檢測人血清中腦紅蛋白(Ngb)含量的檢測試劑盒,併探討其在正常人血清樣本檢測中的應用.方法:採用熱誘導的原覈錶達體繫穫得重組人源腦紅蛋白(rhNgb),通過凝膠過濾和陰離子交換層析等製備rhNgb純品;將適量rhNgb純品免疫動物穫得抗rhNgb單剋隆抗體和多剋隆抗體;用雙抗體夾心ELISA技術製備rhNgb-ELISA檢測試劑盒;用該試劑盒對410例正常人血清中Ngb的含量進行檢測,其中包括1.5歲以下嬰兒血清55例、19-70歲成人血清355例.結果:用製備的rhNgb-ELISA試劑盒檢測髮現Ngb在正常人血清中的分佈與年齡存在明顯的相關性,錶現為"兩頭高、中間低"的趨勢,耍兒和老年人血清中Ngb的含量分彆為1.6708±0.4945和2.1962±0.6703 μmol/L,而中年人血清中Ngb的含量為0.3622±0.0716 μmol/L.結論:採用雙抗夾心EUSA技術併結閤嚴格的質量控製,研髮瞭高效靈敏的rhNgb-ELISA檢測試劑盒,併初步穫得瞭正常人血清中NGb的含量分佈情況,為臨床缺血及缺氧性腦損傷等相關疾病的輔助診斷治療提供瞭參攷信息.
목적:이용ELISA기술연발일충령민、쾌속검측인혈청중뇌홍단백(Ngb)함량적검측시제합,병탐토기재정상인혈청양본검측중적응용.방법:채용열유도적원핵표체체계획득중조인원뇌홍단백(rhNgb),통과응효과려화음리자교환층석등제비rhNgb순품;장괄량rhNgb순품면역동물획득항rhNgb단극륭항체화다극륭항체;용쌍항체협심ELISA기술제비rhNgb-ELISA검측시제합;용해시제합대410례정상인혈청중Ngb적함량진행검측,기중포괄1.5세이하영인혈청55례、19-70세성인혈청355례.결과:용제비적rhNgb-ELISA시제합검측발현Ngb재정상인혈청중적분포여년령존재명현적상관성,표현위"량두고、중간저"적추세,사인화노년인혈청중Ngb적함량분별위1.6708±0.4945화2.1962±0.6703 μmol/L,이중년인혈청중Ngb적함량위0.3622±0.0716 μmol/L.결론:채용쌍항협심EUSA기술병결합엄격적질량공제,연발료고효령민적rhNgb-ELISA검측시제합,병초보획득료정상인혈청중NGb적함량분포정황,위림상결혈급결양성뇌손상등상관질병적보조진단치료제공료삼고신식.
