上海交通大学学报（农业科学版）
上海交通大學學報（農業科學版）
상해교통대학학보（농업과학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2011年
1期
10-15
,共6页
副溶血弧菌%tlh基因%同源重组%基因敲除%溶血活性
副溶血弧菌%tlh基因%同源重組%基因敲除%溶血活性
부용혈호균%tlh기인%동원중조%기인고제%용혈활성
副溶血弧菌(Ⅵbrio parahaemolyticuss,VP)是我国海水养殖鱼、虾、贝类的重要病原,其主要致病因子热不稳定性溶血素(thermolabile hemolysin,TLH)的功能和致病性仍不十分清楚.本研究利用PCR技术从VP临床分离株的基因组DNA中扩增出tlh基因,利用同源重组技术,构建了副溶血弧菌tlh基因打靶载体;利用PCR方法筛选tlh基因缺失株,并在卵磷脂存在条件下进行溶血性检测,结果在5%兔血平板上能够引起溶血,5%的马血琼脂平板未出现溶血现象,说明tlh基因敲除成功.本研究成功构建了副溶血弧菌tlh基因缺失株,为进一步研究tlh基因致病性和溶血机制提供了必要的实验菌株,为副溶血弧菌其他基因的敲除提供了可行性依据.
副溶血弧菌(Ⅵbrio parahaemolyticuss,VP)是我國海水養殖魚、蝦、貝類的重要病原,其主要緻病因子熱不穩定性溶血素(thermolabile hemolysin,TLH)的功能和緻病性仍不十分清楚.本研究利用PCR技術從VP臨床分離株的基因組DNA中擴增齣tlh基因,利用同源重組技術,構建瞭副溶血弧菌tlh基因打靶載體;利用PCR方法篩選tlh基因缺失株,併在卵燐脂存在條件下進行溶血性檢測,結果在5%兔血平闆上能夠引起溶血,5%的馬血瓊脂平闆未齣現溶血現象,說明tlh基因敲除成功.本研究成功構建瞭副溶血弧菌tlh基因缺失株,為進一步研究tlh基因緻病性和溶血機製提供瞭必要的實驗菌株,為副溶血弧菌其他基因的敲除提供瞭可行性依據.
부용혈호균(Ⅵbrio parahaemolyticuss,VP)시아국해수양식어、하、패류적중요병원,기주요치병인자열불은정성용혈소(thermolabile hemolysin,TLH)적공능화치병성잉불십분청초.본연구이용PCR기술종VP림상분리주적기인조DNA중확증출tlh기인,이용동원중조기술,구건료부용혈호균tlh기인타파재체;이용PCR방법사선tlh기인결실주,병재란린지존재조건하진행용혈성검측,결과재5%토혈평판상능구인기용혈,5%적마혈경지평판미출현용혈현상,설명tlh기인고제성공.본연구성공구건료부용혈호균tlh기인결실주,위진일보연구tlh기인치병성화용혈궤제제공료필요적실험균주,위부용혈호균기타기인적고제제공료가행성의거.
