中山大学学报（自然科学版）
中山大學學報（自然科學版）
중산대학학보（자연과학판）
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI
2011年
4期
84-90
,共7页
中花11(Oryza sativa L.subsp. japonica)%AtCPR5%多效性基因%遗传转化
中花11(Oryza sativa L.subsp. japonica)%AtCPR5%多效性基因%遺傳轉化
중화11(Oryza sativa L.subsp. japonica)%AtCPR5%다효성기인%유전전화
利用根癌农杆菌介导法将拟南芥多效性基因CPR5转化水稻中花11,同时优化了其再生体系和遗传转化体系.结果表明:相比27℃、暗培养,32℃、持续光照培养可使诱导率提高到100％,且缩短了诱导周期；预分化培养后,在附加5 mg/L 6-BA和1mg/L NAA的分化培养基上分化率和再生率可分别达到100％和90.50％.同时探索了较高转化频率的条件为A600≈0.05 ～0.1的农杆菌菌液浸染5min,共培养时间为3d,同时添加1张用AAI培养液浸湿的无菌滤纸.对部分转化植株进行PCR、Southern blot和半定量RT-PCR检测,结果表明AtCPR5基因已经整合到水稻基因组中,在所试验的转化植株中均为单拷贝,但表达程度存在差异.
利用根癌農桿菌介導法將擬南芥多效性基因CPR5轉化水稻中花11,同時優化瞭其再生體繫和遺傳轉化體繫.結果錶明:相比27℃、暗培養,32℃、持續光照培養可使誘導率提高到100％,且縮短瞭誘導週期；預分化培養後,在附加5 mg/L 6-BA和1mg/L NAA的分化培養基上分化率和再生率可分彆達到100％和90.50％.同時探索瞭較高轉化頻率的條件為A600≈0.05 ～0.1的農桿菌菌液浸染5min,共培養時間為3d,同時添加1張用AAI培養液浸濕的無菌濾紙.對部分轉化植株進行PCR、Southern blot和半定量RT-PCR檢測,結果錶明AtCPR5基因已經整閤到水稻基因組中,在所試驗的轉化植株中均為單拷貝,但錶達程度存在差異.
이용근암농간균개도법장의남개다효성기인CPR5전화수도중화11,동시우화료기재생체계화유전전화체계.결과표명:상비27℃、암배양,32℃、지속광조배양가사유도솔제고도100％,차축단료유도주기；예분화배양후,재부가5 mg/L 6-BA화1mg/L NAA적분화배양기상분화솔화재생솔가분별체도100％화90.50％.동시탐색료교고전화빈솔적조건위A600≈0.05 ～0.1적농간균균액침염5min,공배양시간위3d,동시첨가1장용AAI배양액침습적무균려지.대부분전화식주진행PCR、Southern blot화반정량RT-PCR검측,결과표명AtCPR5기인이경정합도수도기인조중,재소시험적전화식주중균위단고패,단표체정도존재차이.
