构建骨骼肌特异表达人FS基因载体及其稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞
구건골격기특이표체인FS기인재체급기은정전염면양태인성섬유세포
Construction of a Skeletal Muscle Specific Expression Vector of Follistatin and Its Stable Transfection into Sheep Fetal Fibroblasts Cells
  • 万方数据
    生物技术通报 생물기술통보
    BIOTECHNOLOGY BULLETIN
    2011年 11期 140-145 ,共6页

    王玮%袁建龙%金永%朱兵%岳群华%梁浩%郭旭东%刘东军%仓明

    왕위%원건룡%금영%주병%악군화%량호%곽욱동%류동군%창명

    绵羊%卵泡抑制素%骨骼肌特异表达载体%转基因细胞系 綿羊%卵泡抑製素%骨骼肌特異錶達載體%轉基因細胞繫
    면양%란포억제소%골격기특이표체재체%전기인세포계
    旨在构建骨骼肌特异表达人卵泡抑制素( follistatin,Fs)基因载体并得到其稳定转染的蒙古绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础.首先通过RT-PCR方法克隆得到人FS基因cDNA序列,然后与猪骨骼肌特异表达启动子α-actin以及红色荧光蛋白表达元件连接,构建成FS基因骨骼肌特异表达载体pCFCDS.脂质体介导外源表达载体转染绵羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选后得到稳定转染的绵羊转基因细胞克隆.PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合,分析转基因细胞系的核型和生长状况.结果显示,成功构建得到绵羊骨骼肌特异表达人FS基因的真核表达载体,并得到其稳定转染的转基因绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础.
    지재구건골격기특이표체인란포억제소( follistatin,Fs)기인재체병득도기은정전염적몽고면양태인성섬유세포계,위후기통과체세포핵이식방법제작전FS기인극륭면양전정기출.수선통과RT-PCR방법극륭득도인FS기인cDNA서렬,연후여저골격기특이표체계동자α-actin이급홍색형광단백표체원건련접,구건성FS기인골격기특이표체재체pCFCDS.지질체개도외원표체재체전염면양태인성섬유세포,경G418사선후득도은정전염적면양전기인세포극륭.PCR감정외원기인재세포기인조중적정합,분석전기인세포계적핵형화생장상황.결과현시,성공구건득도면양골격기특이표체인FS기인적진핵표체재체,병득도기은정전염적전기인면양태인성섬유세포계,위후기통과체세포핵이식방법제작전FS기인극륭면양전정기출.
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