重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2011年
11期
1339-1342
,共4页
贾健锋%程勇%郑梦颖%饶明月
賈健鋒%程勇%鄭夢穎%饒明月
가건봉%정용%정몽영%요명월
结直肠肿瘤%肿瘤干细胞%上皮-间质化%无血清培养%CD133
結直腸腫瘤%腫瘤榦細胞%上皮-間質化%無血清培養%CD133
결직장종류%종류간세포%상피-간질화%무혈청배양%CD133
目的:无血清悬浮培养生成5种人结直肠肿瘤细胞球,体外稳定传代培养,研究其在体外增殖、分化及转移等生物学特性.方法:人结直肠癌细胞SW480、SW620、LOVO、HT29和HCT116在添加了细胞生长因子的无血清培养基(Serum-free medium,SFM)中悬浮培养,稳定传代并诱导分化.选择其中HCT116细胞系用流式细胞技术检测单层细胞及其肿瘤细胞球干细胞标记分子CD133+的表达.Transwell小室实验、免疫荧光及RT-PCR分别检测HCT116单层细胞及其肿瘤细胞球的体外转移能力,以及间质化标记分子N-cadherin及Vimentin的表达.结果:5种人结直肠癌细胞系均在SFM中形成能稳定传代培养的肿瘤细胞球,其在含血清培养基(Semm supplemented medium,SSM)中重新贴壁生长并各自恢复亲代细胞的生物学特性.与HCT116单层细胞相比,HCT 116肿瘤细胞球中CD133+细胞比例显著增多,并具有更强的转移能力,以及高表达间质化标记分子N-cad-herin及Vimentin.结论:通过无血清培养可以生成人结直肠肿瘤细胞球,这些球体中富含肿瘤干细胞样特性的细胞.
目的:無血清懸浮培養生成5種人結直腸腫瘤細胞毬,體外穩定傳代培養,研究其在體外增殖、分化及轉移等生物學特性.方法:人結直腸癌細胞SW480、SW620、LOVO、HT29和HCT116在添加瞭細胞生長因子的無血清培養基(Serum-free medium,SFM)中懸浮培養,穩定傳代併誘導分化.選擇其中HCT116細胞繫用流式細胞技術檢測單層細胞及其腫瘤細胞毬榦細胞標記分子CD133+的錶達.Transwell小室實驗、免疫熒光及RT-PCR分彆檢測HCT116單層細胞及其腫瘤細胞毬的體外轉移能力,以及間質化標記分子N-cadherin及Vimentin的錶達.結果:5種人結直腸癌細胞繫均在SFM中形成能穩定傳代培養的腫瘤細胞毬,其在含血清培養基(Semm supplemented medium,SSM)中重新貼壁生長併各自恢複親代細胞的生物學特性.與HCT116單層細胞相比,HCT 116腫瘤細胞毬中CD133+細胞比例顯著增多,併具有更彊的轉移能力,以及高錶達間質化標記分子N-cad-herin及Vimentin.結論:通過無血清培養可以生成人結直腸腫瘤細胞毬,這些毬體中富含腫瘤榦細胞樣特性的細胞.
목적:무혈청현부배양생성5충인결직장종류세포구,체외은정전대배양,연구기재체외증식、분화급전이등생물학특성.방법:인결직장암세포SW480、SW620、LOVO、HT29화HCT116재첨가료세포생장인자적무혈청배양기(Serum-free medium,SFM)중현부배양,은정전대병유도분화.선택기중HCT116세포계용류식세포기술검측단층세포급기종류세포구간세포표기분자CD133+적표체.Transwell소실실험、면역형광급RT-PCR분별검측HCT116단층세포급기종류세포구적체외전이능력,이급간질화표기분자N-cadherin급Vimentin적표체.결과:5충인결직장암세포계균재SFM중형성능은정전대배양적종류세포구,기재함혈청배양기(Semm supplemented medium,SSM)중중신첩벽생장병각자회복친대세포적생물학특성.여HCT116단층세포상비,HCT 116종류세포구중CD133+세포비례현저증다,병구유경강적전이능력,이급고표체간질화표기분자N-cad-herin급Vimentin.결론:통과무혈청배양가이생성인결직장종류세포구,저사구체중부함종류간세포양특성적세포.
