中国全科医学
中國全科醫學
중국전과의학
CHINESE GENERAL PRACTICE
2012年
27期
3149-3153
,共5页
成纤维生长因子2%癫痫%神经元%细胞凋亡%谷氨酸
成纖維生長因子2%癲癇%神經元%細胞凋亡%穀氨痠
성섬유생장인자2%전간%신경원%세포조망%곡안산
目的 建立体外神经元损伤模型,观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对损伤神经元存活的保护作用,了解bFGF对神经元的作用和机制,为神经损伤提供新的治疗措施.方法 在体外培养10 d的海马神经元中加入50 μmol/L的谷氨酸,相差显微镜下观察细胞形态变化,用苔盼蓝染色法检测存活率和细胞凋亡原位(TUNEL)检测凋亡率,来评定谷氨酸对海马神经元的损伤程度.以低浓度谷氨酸诱导神经元凋亡,应用免疫组化、苔盼蓝染色法和TUNEL检测等技术,在实验组中加入bFGF(20 ng/ml),观察bFGF对损伤神经元存活的保护作用以及caspase-3基因在损伤神经元中的表达情况.结果 谷氨酸作用于海马神经元4 h后,可见部分细胞变圆,胞体肿胀,突起缩短或消失;24 h后大部分肿胀细胞崩解.通过苔盼蓝染色法检测神经元存活率,实验组神经元存活率[(83.8±6.8)%]与对照组[(77.4±6.5)%]比较,差异有统计学意义(t=8.52,P＜0.05);谷氨酸作用于海马神经元24 h后,TUNEL检测显示凋亡神经元表面皱缩,体积缩小,胞核固缩.实验组神经元凋亡率[(1.5±0.7)%]与对照组[(2.7±1.4)%]比较,差异有统计学意义(t=-10.35,P＜0.05).凋亡后3 d内3组的神经元存活率比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);其中正常组较实验组和对照组神经元存活率均显著增加,实验组较对照组亦显著增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).凋亡后3 d内3组的神经元凋亡率比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),其中正常组较实验组和对照组神经元凋亡率均显著减少,实验组较对照组亦显著减少,差异均有统计学意义(P＜0.05).凋亡后3 d内3组caspase-3基因阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),正常组较实验组和对照组caspase-3基因阳性表达率均显著减少,实验组较对照组亦显著减少,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 在神经元中加入bFGF后,神经元存活率升高,神经元凋亡率和caspase-3基因阳性表达率降低,提示bFGF对损伤神经元有保护作用.bFGF可能是通过减少caspase-3通路激活,进而抑制神经元凋亡,从而发挥对神经元的保护作用.
目的 建立體外神經元損傷模型,觀察堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)對損傷神經元存活的保護作用,瞭解bFGF對神經元的作用和機製,為神經損傷提供新的治療措施.方法 在體外培養10 d的海馬神經元中加入50 μmol/L的穀氨痠,相差顯微鏡下觀察細胞形態變化,用苔盼藍染色法檢測存活率和細胞凋亡原位(TUNEL)檢測凋亡率,來評定穀氨痠對海馬神經元的損傷程度.以低濃度穀氨痠誘導神經元凋亡,應用免疫組化、苔盼藍染色法和TUNEL檢測等技術,在實驗組中加入bFGF(20 ng/ml),觀察bFGF對損傷神經元存活的保護作用以及caspase-3基因在損傷神經元中的錶達情況.結果 穀氨痠作用于海馬神經元4 h後,可見部分細胞變圓,胞體腫脹,突起縮短或消失;24 h後大部分腫脹細胞崩解.通過苔盼藍染色法檢測神經元存活率,實驗組神經元存活率[(83.8±6.8)%]與對照組[(77.4±6.5)%]比較,差異有統計學意義(t=8.52,P＜0.05);穀氨痠作用于海馬神經元24 h後,TUNEL檢測顯示凋亡神經元錶麵皺縮,體積縮小,胞覈固縮.實驗組神經元凋亡率[(1.5±0.7)%]與對照組[(2.7±1.4)%]比較,差異有統計學意義(t=-10.35,P＜0.05).凋亡後3 d內3組的神經元存活率比較,差異均有統計學意義(P＜0.05);其中正常組較實驗組和對照組神經元存活率均顯著增加,實驗組較對照組亦顯著增加,差異均有統計學意義(P＜0.05).凋亡後3 d內3組的神經元凋亡率比較,差異均有統計學意義(P＜0.05),其中正常組較實驗組和對照組神經元凋亡率均顯著減少,實驗組較對照組亦顯著減少,差異均有統計學意義(P＜0.05).凋亡後3 d內3組caspase-3基因暘性錶達率比較,差異均有統計學意義(P＜0.05),正常組較實驗組和對照組caspase-3基因暘性錶達率均顯著減少,實驗組較對照組亦顯著減少,差異均有統計學意義(P＜0.05).結論 在神經元中加入bFGF後,神經元存活率升高,神經元凋亡率和caspase-3基因暘性錶達率降低,提示bFGF對損傷神經元有保護作用.bFGF可能是通過減少caspase-3通路激活,進而抑製神經元凋亡,從而髮揮對神經元的保護作用.
목적 건입체외신경원손상모형,관찰감성성섬유세포생장인자(bFGF)대손상신경원존활적보호작용,료해bFGF대신경원적작용화궤제,위신경손상제공신적치료조시.방법 재체외배양10 d적해마신경원중가입50 μmol/L적곡안산,상차현미경하관찰세포형태변화,용태반람염색법검측존활솔화세포조망원위(TUNEL)검측조망솔,래평정곡안산대해마신경원적손상정도.이저농도곡안산유도신경원조망,응용면역조화、태반람염색법화TUNEL검측등기술,재실험조중가입bFGF(20 ng/ml),관찰bFGF대손상신경원존활적보호작용이급caspase-3기인재손상신경원중적표체정황.결과 곡안산작용우해마신경원4 h후,가견부분세포변원,포체종창,돌기축단혹소실;24 h후대부분종창세포붕해.통과태반람염색법검측신경원존활솔,실험조신경원존활솔[(83.8±6.8)%]여대조조[(77.4±6.5)%]비교,차이유통계학의의(t=8.52,P＜0.05);곡안산작용우해마신경원24 h후,TUNEL검측현시조망신경원표면추축,체적축소,포핵고축.실험조신경원조망솔[(1.5±0.7)%]여대조조[(2.7±1.4)%]비교,차이유통계학의의(t=-10.35,P＜0.05).조망후3 d내3조적신경원존활솔비교,차이균유통계학의의(P＜0.05);기중정상조교실험조화대조조신경원존활솔균현저증가,실험조교대조조역현저증가,차이균유통계학의의(P＜0.05).조망후3 d내3조적신경원조망솔비교,차이균유통계학의의(P＜0.05),기중정상조교실험조화대조조신경원조망솔균현저감소,실험조교대조조역현저감소,차이균유통계학의의(P＜0.05).조망후3 d내3조caspase-3기인양성표체솔비교,차이균유통계학의의(P＜0.05),정상조교실험조화대조조caspase-3기인양성표체솔균현저감소,실험조교대조조역현저감소,차이균유통계학의의(P＜0.05).결론 재신경원중가입bFGF후,신경원존활솔승고,신경원조망솔화caspase-3기인양성표체솔강저,제시bFGF대손상신경원유보호작용.bFGF가능시통과감소caspase-3통로격활,진이억제신경원조망,종이발휘대신경원적보호작용.
