眼科
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안과
OPHTHALMOLOGY IN CHINA
2012年
4期
261-263
,共3页
胡健艳%吴强%宋蓓雯%贾丽丽%陈永东%严良
鬍健豔%吳彊%宋蓓雯%賈麗麗%陳永東%嚴良
호건염%오강%송배문%가려려%진영동%엄량
视网膜微血管内皮细胞%大鼠%细胞培养
視網膜微血管內皮細胞%大鼠%細胞培養
시망막미혈관내피세포%대서%세포배양
目的 探讨大鼠视网膜微血管内皮细胞原代培养改进方法,为研究视网膜新生血管疾病的病理机制奠定基础.设计 实验研究.研究对象 大鼠视网膜微血管内皮细胞.方法 采用机械剪除大鼠视网膜血管联合酶消化分离,用含胎牛血清、内皮细胞培养特制添加剂等的条件培养基培养及纯化大鼠视网膜微血管内皮细胞,倒置相差显微镜下观察细胞生长状态.应用因子Ⅷ、血小板内皮细胞黏附分子-1(CD31)免疫鉴定细胞.主要指标 微血管内皮细胞形态,免疫荧光染色.结果 原代培养的大鼠视网膜微血管内皮细胞贴壁后散在分布,呈单层排列,多为梭形,边界清楚,少量呈铺路石样螺旋向外生长,3～5天后融合,呈簇状单层分布.免疫荧光细胞染色显示,因子Ⅷ抗体染色核周出现黄绿色荧光反应,CD31因子抗体染色以胞浆着色为主.细胞纯度较高,荧光染色阳性细胞率为95％.结论 采用机械剪除大鼠视网膜血管、胰蛋白酶和胶原酶消化、含特制添加剂培养基的应用、明胶包被培养瓶等综合法可获得较纯的大鼠视网膜微血管内皮细胞.
目的 探討大鼠視網膜微血管內皮細胞原代培養改進方法,為研究視網膜新生血管疾病的病理機製奠定基礎.設計 實驗研究.研究對象 大鼠視網膜微血管內皮細胞.方法 採用機械剪除大鼠視網膜血管聯閤酶消化分離,用含胎牛血清、內皮細胞培養特製添加劑等的條件培養基培養及純化大鼠視網膜微血管內皮細胞,倒置相差顯微鏡下觀察細胞生長狀態.應用因子Ⅷ、血小闆內皮細胞黏附分子-1(CD31)免疫鑒定細胞.主要指標 微血管內皮細胞形態,免疫熒光染色.結果 原代培養的大鼠視網膜微血管內皮細胞貼壁後散在分佈,呈單層排列,多為梭形,邊界清楚,少量呈鋪路石樣螺鏇嚮外生長,3～5天後融閤,呈簇狀單層分佈.免疫熒光細胞染色顯示,因子Ⅷ抗體染色覈週齣現黃綠色熒光反應,CD31因子抗體染色以胞漿著色為主.細胞純度較高,熒光染色暘性細胞率為95％.結論 採用機械剪除大鼠視網膜血管、胰蛋白酶和膠原酶消化、含特製添加劑培養基的應用、明膠包被培養瓶等綜閤法可穫得較純的大鼠視網膜微血管內皮細胞.
목적 탐토대서시망막미혈관내피세포원대배양개진방법,위연구시망막신생혈관질병적병리궤제전정기출.설계 실험연구.연구대상 대서시망막미혈관내피세포.방법 채용궤계전제대서시망막혈관연합매소화분리,용함태우혈청、내피세포배양특제첨가제등적조건배양기배양급순화대서시망막미혈관내피세포,도치상차현미경하관찰세포생장상태.응용인자Ⅷ、혈소판내피세포점부분자-1(CD31)면역감정세포.주요지표 미혈관내피세포형태,면역형광염색.결과 원대배양적대서시망막미혈관내피세포첩벽후산재분포,정단층배렬,다위사형,변계청초,소량정포로석양라선향외생장,3～5천후융합,정족상단층분포.면역형광세포염색현시,인자Ⅷ항체염색핵주출현황록색형광반응,CD31인자항체염색이포장착색위주.세포순도교고,형광염색양성세포솔위95％.결론 채용궤계전제대서시망막혈관、이단백매화효원매소화、함특제첨가제배양기적응용、명효포피배양병등종합법가획득교순적대서시망막미혈관내피세포.
