中华整形外科杂志
中華整形外科雜誌
중화정형외과잡지
CHINESE JOURNAL OF PLASTIC SURGERY
2007年
5期
412-416
,共5页
鲁峰%高建华%水野博司%小川令%百束比古
魯峰%高建華%水野博司%小川令%百束比古
로봉%고건화%수야박사%소천령%백속비고
脂肪组织来源干细胞%组织工程%GFP转基因小鼠
脂肪組織來源榦細胞%組織工程%GFP轉基因小鼠
지방조직래원간세포%조직공정%GFP전기인소서
目的 分离和培养脂肪组织来源干细胞(ASCs),鉴定其是否具有干细胞表面标志,研究携带GFP基因的ASCs向脂肪组织的体外定向诱导分化能力,同时判断种子细胞ASCs与Ⅰ型胶原支架混合培养后在体内构建组织工程化脂肪组织的可能性.方法 取GFP小鼠腹股沟部脂肪组织,使用酶消化法进行原代培养,流式细胞仪鉴定其表面干细胞标志,细胞传至第3代后使用脂肪分化培养基诱导2周,观察细胞形态及功能变化.将诱导分化后的细胞与支架材料混合培养后12 h,将支架材料移植到裸鼠背部皮下,观察新生组织情况,并对新生组织使用HE及油红O染色进行鉴定.结果 原代培养的ASC形态类似于成纤维细胞,具有很强的增殖能力,能持续稳定表达表面干细胞标志.在脂肪分化培养基的作用下,胞浆内脂滴不断聚集,逐渐演变为成熟的脂肪细胞,油红O染色阳性.体内实验中在裸鼠皮下发现了0.5 ml的新生组织块,常规病理及油红O染色均证实其为成熟脂肪组织块.结论 脂肪组织来源的干细胞ASC能在体外定向诱导分化为成熟脂肪细胞,且ASC能作用种子细胞与Ⅰ型胶原支架在体内成功构建脂肪组织.
目的 分離和培養脂肪組織來源榦細胞(ASCs),鑒定其是否具有榦細胞錶麵標誌,研究攜帶GFP基因的ASCs嚮脂肪組織的體外定嚮誘導分化能力,同時判斷種子細胞ASCs與Ⅰ型膠原支架混閤培養後在體內構建組織工程化脂肪組織的可能性.方法 取GFP小鼠腹股溝部脂肪組織,使用酶消化法進行原代培養,流式細胞儀鑒定其錶麵榦細胞標誌,細胞傳至第3代後使用脂肪分化培養基誘導2週,觀察細胞形態及功能變化.將誘導分化後的細胞與支架材料混閤培養後12 h,將支架材料移植到裸鼠揹部皮下,觀察新生組織情況,併對新生組織使用HE及油紅O染色進行鑒定.結果 原代培養的ASC形態類似于成纖維細胞,具有很彊的增殖能力,能持續穩定錶達錶麵榦細胞標誌.在脂肪分化培養基的作用下,胞漿內脂滴不斷聚集,逐漸縯變為成熟的脂肪細胞,油紅O染色暘性.體內實驗中在裸鼠皮下髮現瞭0.5 ml的新生組織塊,常規病理及油紅O染色均證實其為成熟脂肪組織塊.結論 脂肪組織來源的榦細胞ASC能在體外定嚮誘導分化為成熟脂肪細胞,且ASC能作用種子細胞與Ⅰ型膠原支架在體內成功構建脂肪組織.
목적 분리화배양지방조직래원간세포(ASCs),감정기시부구유간세포표면표지,연구휴대GFP기인적ASCs향지방조직적체외정향유도분화능력,동시판단충자세포ASCs여Ⅰ형효원지가혼합배양후재체내구건조직공정화지방조직적가능성.방법 취GFP소서복고구부지방조직,사용매소화법진행원대배양,류식세포의감정기표면간세포표지,세포전지제3대후사용지방분화배양기유도2주,관찰세포형태급공능변화.장유도분화후적세포여지가재료혼합배양후12 h,장지가재료이식도라서배부피하,관찰신생조직정황,병대신생조직사용HE급유홍O염색진행감정.결과 원대배양적ASC형태유사우성섬유세포,구유흔강적증식능력,능지속은정표체표면간세포표지.재지방분화배양기적작용하,포장내지적불단취집,축점연변위성숙적지방세포,유홍O염색양성.체내실험중재라서피하발현료0.5 ml적신생조직괴,상규병리급유홍O염색균증실기위성숙지방조직괴.결론 지방조직래원적간세포ASC능재체외정향유도분화위성숙지방세포,차ASC능작용충자세포여Ⅰ형효원지가재체내성공구건지방조직.
