水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2006年
4期
380-385
,共6页
陈合格%刘文彬%李建中%张轩杰
陳閤格%劉文彬%李建中%張軒傑
진합격%류문빈%리건중%장헌걸
中华鳖%砂鳖%山瑞鳖%细胞色素b%PCR-RFLP分析%分子鉴定标记
中華鱉%砂鱉%山瑞鱉%細胞色素b%PCR-RFLP分析%分子鑒定標記
중화별%사별%산서별%세포색소b%PCR-RFLP분석%분자감정표기
对中华鳖、砂鳖和山瑞鳖线粒体DNA细胞色素b基因进行了引物设计、PCR扩增、序列测定和PCR-PFLP(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism)分析.研究结果表明中华鳖、砂鳖与山瑞鳖线粒体DNA Cytb基因的序列全长相同,均为1140bp,其A、C、G、T含量相似,分别为378个(33.2%)、322个(28.2%)、122个(10.7%)、318个(27.9%)、373个(32.7%)、324个(28.4%)、124个(10.9%)、319个(28.0%)、380个(33.3%)、330个(28.9%)、127个(11.1%)、303个(26.7%).同源性及序列差异率分析表明:中华鳖与砂鳖b基因序列的同源性为92.3%,中华鳖、山瑞鳖的为85.0%,砂鳖、山瑞鳖的为84.1%;中华鳖与砂鳖b基因核苷酸序列间的差异率为7.7%,中华鳖、山瑞鳖间的序列差异率为15.0%,砂鳖、山瑞鳖间的序列差异率为15.9%,而中华鳖、砂鳖、山瑞鳖各自个体间的序列差异率分别为2.37%、0.88%和0.18%,种间差异显著.用内切酶酶切分析其扩增产物,结果表明:用内切酶Nde Ⅰ可准确鉴别砂鳖,而用内切酶BamHⅠ则可准确鉴别山瑞鳖.内切酶NdeⅠ和BamHⅠ的联用分析,可使这三种鳖在分子水平都得到明确的鉴定.从三种鳖线粒体DNA Cytb基因核苷酸序列的显著差异和酶切位点的变化,可以进一步证明砂鳖是不同于中华鳖的鳖属一新种.
對中華鱉、砂鱉和山瑞鱉線粒體DNA細胞色素b基因進行瞭引物設計、PCR擴增、序列測定和PCR-PFLP(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism)分析.研究結果錶明中華鱉、砂鱉與山瑞鱉線粒體DNA Cytb基因的序列全長相同,均為1140bp,其A、C、G、T含量相似,分彆為378箇(33.2%)、322箇(28.2%)、122箇(10.7%)、318箇(27.9%)、373箇(32.7%)、324箇(28.4%)、124箇(10.9%)、319箇(28.0%)、380箇(33.3%)、330箇(28.9%)、127箇(11.1%)、303箇(26.7%).同源性及序列差異率分析錶明:中華鱉與砂鱉b基因序列的同源性為92.3%,中華鱉、山瑞鱉的為85.0%,砂鱉、山瑞鱉的為84.1%;中華鱉與砂鱉b基因覈苷痠序列間的差異率為7.7%,中華鱉、山瑞鱉間的序列差異率為15.0%,砂鱉、山瑞鱉間的序列差異率為15.9%,而中華鱉、砂鱉、山瑞鱉各自箇體間的序列差異率分彆為2.37%、0.88%和0.18%,種間差異顯著.用內切酶酶切分析其擴增產物,結果錶明:用內切酶Nde Ⅰ可準確鑒彆砂鱉,而用內切酶BamHⅠ則可準確鑒彆山瑞鱉.內切酶NdeⅠ和BamHⅠ的聯用分析,可使這三種鱉在分子水平都得到明確的鑒定.從三種鱉線粒體DNA Cytb基因覈苷痠序列的顯著差異和酶切位點的變化,可以進一步證明砂鱉是不同于中華鱉的鱉屬一新種.
대중화별、사별화산서별선립체DNA세포색소b기인진행료인물설계、PCR확증、서렬측정화PCR-PFLP(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism)분석.연구결과표명중화별、사별여산서별선립체DNA Cytb기인적서렬전장상동,균위1140bp,기A、C、G、T함량상사,분별위378개(33.2%)、322개(28.2%)、122개(10.7%)、318개(27.9%)、373개(32.7%)、324개(28.4%)、124개(10.9%)、319개(28.0%)、380개(33.3%)、330개(28.9%)、127개(11.1%)、303개(26.7%).동원성급서렬차이솔분석표명:중화별여사별b기인서렬적동원성위92.3%,중화별、산서별적위85.0%,사별、산서별적위84.1%;중화별여사별b기인핵감산서렬간적차이솔위7.7%,중화별、산서별간적서렬차이솔위15.0%,사별、산서별간적서렬차이솔위15.9%,이중화별、사별、산서별각자개체간적서렬차이솔분별위2.37%、0.88%화0.18%,충간차이현저.용내절매매절분석기확증산물,결과표명:용내절매Nde Ⅰ가준학감별사별,이용내절매BamHⅠ칙가준학감별산서별.내절매NdeⅠ화BamHⅠ적련용분석,가사저삼충별재분자수평도득도명학적감정.종삼충별선립체DNA Cytb기인핵감산서렬적현저차이화매절위점적변화,가이진일보증명사별시불동우중화별적별속일신충.