CAJ | 학술논문

目的:研究支气管哮喘豚鼠肺内Nrf2对γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的作用.方法:成年雄性豚鼠20只,随机分成2组(n=10):①对照组(C组);②哮喘组(A组),以腹腔内注射联合雾化吸入卵蛋白复制哮喘模型.测肺组织中活性氧(ROS)、还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)和总谷胱甘肽的含量;测细支气管炎症细胞浸润及支气管重塑指标;原位杂交测肺组织中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶重链(γ-GCSh)mRNA表达;免疫组化测γ-GCS和Nrf2蛋白质在肺组织中的表达;RT-PCR测Nrf2 mRNA在肺组织中的表达;双酶法测γ-GCS的活性.结果:①A组细支气管嗜酸性粒细胞(E)数和淋巴细胞(L)数,较C组明显增多(P＜0.01),并出现细支气管重塑.②A组肺组织中ROS、GSSG和总谷胱甘肽较C组明显增高(P＜0.01),与C组比较,GSH/GSSG明显下降(P＜0.01),而GSH差异无统计学意义.③免疫组化显示Nrf2和γ-GCS A组较C组明显增高(P＜0.01);原位杂交显示γ-GCS-h mRNA表达A组较C组亦明显增高(P＜0.01).④RT-PCR显示在肺组织中Nrf2 mRNA转录C组和A组无明显差异.⑤γ-GCS活性A组为(28±8)U,与C组(9±2)U比较,差异有统计学意义(P＜0.01).⑥直线相关性分析显示:在肺组织中Nrf2与ROS、GSSG、γ-GCS-h mRNA、γ-GCS蛋白质及γ-GCS活性呈高度正相关;GSH/GSSG与Nrf2蛋白质、γ-GCS-hmRNA、γ-GCS蛋白质及γ-GCS活性呈高度负相关.结论:在支气管哮喘豚鼠肺中存在氧化应激,氧化应激可能通过上调Nrf2而上调γ-GCS表达.
목적:연구지기관효천돈서폐내Nrf2대γ-곡안선반광안산합성매(γ-GCS)적작용.방법:성년웅성돈서20지,수궤분성2조(n=10):①대조조(C조);②효천조(A조),이복강내주사연합무화흡입란단백복제효천모형.측폐조직중활성양(ROS)、환원형곡광감태(GSH)、양화형곡광감태(GSSG)화총곡광감태적함량;측세지기관염증세포침윤급지기관중소지표;원위잡교측폐조직중γ-곡안선반광안산합성매중련(γ-GCSh)mRNA표체;면역조화측γ-GCS화Nrf2단백질재폐조직중적표체;RT-PCR측Nrf2 mRNA재폐조직중적표체;쌍매법측γ-GCS적활성.결과:①A조세지기관기산성립세포(E)수화림파세포(L)수,교C조명현증다(P＜0.01),병출현세지기관중소.②A조폐조직중ROS、GSSG화총곡광감태교C조명현증고(P＜0.01),여C조비교,GSH/GSSG명현하강(P＜0.01),이GSH차이무통계학의의.③면역조화현시Nrf2화γ-GCS A조교C조명현증고(P＜0.01);원위잡교현시γ-GCS-h mRNA표체A조교C조역명현증고(P＜0.01).④RT-PCR현시재폐조직중Nrf2 mRNA전록C조화A조무명현차이.⑤γ-GCS활성A조위(28±8)U,여C조(9±2)U비교,차이유통계학의의(P＜0.01).⑥직선상관성분석현시:재폐조직중Nrf2여ROS、GSSG、γ-GCS-h mRNA、γ-GCS단백질급γ-GCS활성정고도정상관;GSH/GSSG여Nrf2단백질、γ-GCS-hmRNA、γ-GCS단백질급γ-GCS활성정고도부상관.결론:재지기관효천돈서폐중존재양화응격,양화응격가능통과상조Nrf2이상조γ-GCS표체.