中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2008年
10期
775-778
,共4页
张福良%王双山%欧阳素贞
張福良%王雙山%歐暘素貞
장복량%왕쌍산%구양소정
猪圆环病毒2型%重组腺病毒%免疫效果
豬圓環病毒2型%重組腺病毒%免疫效果
저원배병독2형%중조선병독%면역효과
采用PCR方法克隆猪圆环病毒2型(PCV2)Rep和Cap蛋白基因,以串联的方式依次克隆到pMD18-T载体中.经鉴定后亚克隆于腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV.重组穿梭质粒用Pme Ⅰ线性化后与腺病毒骨架载体pAdeasy-1在大肠杆菌BJ5183株内进行同源重组产生重组腺病毒质粒.将重组腺病毒质粒用Pac Ⅰ线性化后转染293细胞中包装成为完整的腺病毒.将构建的重组腺病毒按照每100μL 1×107蚀宽单位(PFU)滴鼻2次免疫6～8周龄BALB/c小鼠,经尾部采血获得一免、二免血清.用ELISA方法检测结果表明,该重组腺病毒可以诱导机体产生针对PCV2的特异性抗体,可作为候选基因工程疫苗进行本体动物免疫试验研究.
採用PCR方法剋隆豬圓環病毒2型(PCV2)Rep和Cap蛋白基因,以串聯的方式依次剋隆到pMD18-T載體中.經鑒定後亞剋隆于腺病毒穿梭質粒pAdTrack-CMV.重組穿梭質粒用Pme Ⅰ線性化後與腺病毒骨架載體pAdeasy-1在大腸桿菌BJ5183株內進行同源重組產生重組腺病毒質粒.將重組腺病毒質粒用Pac Ⅰ線性化後轉染293細胞中包裝成為完整的腺病毒.將構建的重組腺病毒按照每100μL 1×107蝕寬單位(PFU)滴鼻2次免疫6～8週齡BALB/c小鼠,經尾部採血穫得一免、二免血清.用ELISA方法檢測結果錶明,該重組腺病毒可以誘導機體產生針對PCV2的特異性抗體,可作為候選基因工程疫苗進行本體動物免疫試驗研究.
채용PCR방법극륭저원배병독2형(PCV2)Rep화Cap단백기인,이천련적방식의차극륭도pMD18-T재체중.경감정후아극륭우선병독천사질립pAdTrack-CMV.중조천사질립용Pme Ⅰ선성화후여선병독골가재체pAdeasy-1재대장간균BJ5183주내진행동원중조산생중조선병독질립.장중조선병독질립용Pac Ⅰ선성화후전염293세포중포장성위완정적선병독.장구건적중조선병독안조매100μL 1×107식관단위(PFU)적비2차면역6～8주령BALB/c소서,경미부채혈획득일면、이면혈청.용ELISA방법검측결과표명,해중조선병독가이유도궤체산생침대PCV2적특이성항체,가작위후선기인공정역묘진행본체동물면역시험연구.
