CAJ | 학술논문

背景:国外一些研究表明细菌纤维素作为组织工程支架材料在组织工程方面有很大的应用潜力,但国内在这方面的报道非常少.目的:以大鼠脂肪干细胞作为组织工程种子细胞,考察其与细菌纤维素复合培养的效果.设计、时间及地点:观察性实验,于2007-0912008-08在吉林大学约学院生物工程实验中心和吉林大学第一医院耳鼻咽喉-头颈外科研究所完成.材料:细菌纤维素膜由天津科技大学天津市工业微生物重点实验室制备,材料的平均孔径为0.6-2.8μm,孔隙率为90%.方法:取3周龄Wistar大鼠腹股沟部脂肪垫,以Ⅱ型胶原酶消化获得大鼠脂肪干细胞,采用含有体积分数为0.1新生牛血清的DMEM培养液进行培养.将处十对数生长期的细胞,以3.0×108L-1的密度种植于细菌纤维素膜上,采用含有体积分数为0.1新生牛血清的DMEM培养液继续培养,分别于培养的不同时间取细胞-材料复合物,冰冻切片.采用免疫荧光染色方法对生长于细菌纤维素膜上脂肪干细胞的生物学特征进行测定.主要观察指标:①体外培养大鼠脂肪干细胞形态.②苏木精-伊红染色观察脂肪干细胞在细菌纤维素膜上的生长情况.③免疫荧光染色标记蛋白-CD29在复合物上脂肪干细胞中的表达.结果:体外原代培养72 h的脂肪干细胞以长梭形为主,7 d后梭形细胞逐渐增多融合,细胞对数生长期为第3～9天.细胞-支架复合物在培养第10天经苏木精-伊红染色后可见细胞呈单层生长于细菌纤维素膜表面,细胞与细菌纤维素膜接触紧密,未见深入细菌纤维素膜内部生长的细胞.免疫荧光技术分析结果表明,标记蛋白-CD29在细菌纤维素膜上的脂肪干细胞有特异性表达.结论:生长于细菌纤维素膜上的脂肪干细胞不仅能够增殖,而且仍然保持着干细胞的生物学活性.
배경:국외일사연구표명세균섬유소작위조직공정지가재료재조직공정방면유흔대적응용잠력,단국내재저방면적보도비상소.목적:이대서지방간세포작위조직공정충자세포,고찰기여세균섬유소복합배양적효과.설계、시간급지점:관찰성실험,우2007-0912008-08재길림대학약학원생물공정실험중심화길림대학제일의원이비인후-두경외과연구소완성.재료:세균섬유소막유천진과기대학천진시공업미생물중점실험실제비,재료적평균공경위0.6-2.8μm,공극솔위90%.방법:취3주령Wistar대서복고구부지방점,이Ⅱ형효원매소화획득대서지방간세포,채용함유체적분수위0.1신생우혈청적DMEM배양액진행배양.장처십대수생장기적세포,이3.0×108L-1적밀도충식우세균섬유소막상,채용함유체적분수위0.1신생우혈청적DMEM배양액계속배양,분별우배양적불동시간취세포-재료복합물,빙동절편.채용면역형광염색방법대생장우세균섬유소막상지방간세포적생물학특정진행측정.주요관찰지표:①체외배양대서지방간세포형태.②소목정-이홍염색관찰지방간세포재세균섬유소막상적생장정황.③면역형광염색표기단백-CD29재복합물상지방간세포중적표체.결과:체외원대배양72 h적지방간세포이장사형위주,7 d후사형세포축점증다융합,세포대수생장기위제3～9천.세포-지가복합물재배양제10천경소목정-이홍염색후가견세포정단층생장우세균섬유소막표면,세포여세균섬유소막접촉긴밀,미견심입세균섬유소막내부생장적세포.면역형광기술분석결과표명,표기단백-CD29재세균섬유소막상적지방간세포유특이성표체.결론:생장우세균섬유소막상적지방간세포불부능구증식,이차잉연보지착간세포적생물학활성.