西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2011年
2期
248-254
,共7页
梁文裕%焦广飞%游向荣%周有文%陈伟
樑文裕%焦廣飛%遊嚮榮%週有文%陳偉
량문유%초엄비%유향영%주유문%진위
发菜%差异蛋白%Mn-CAT基因%克隆%原核表达
髮菜%差異蛋白%Mn-CAT基因%剋隆%原覈錶達
발채%차이단백%Mn-CAT기인%극륭%원핵표체
运用双向凝胶电泳技术、MALDI-TOF-TOF/MS质谱鉴定和数据库检索,分析发菜锰过氧化氢酶(Mn-CAT)在干燥和复吸水后的差异表达水平,根据Mn-CAT鉴定的已知氨基酸序列设计简并引物克隆该基因,并研究其原核表达.结果表明:干燥发菜复吸水后Mn-CAT表达量明显高于干燥状态下的表达量.使用简并引物克隆获得长度为693 bp的Mn-CAT基因(GenBank登录号为GU549477).将Mn-CAT基因在大肠杆菌中表达,获得1个约26 kD的外源蛋白,经Western blotting验证,该外源蛋白为Mn-CAT.研究结果为进一步研究发菜耐旱的分子机理、探讨发菜对极端干旱环境的适应机制奠定了基础.
運用雙嚮凝膠電泳技術、MALDI-TOF-TOF/MS質譜鑒定和數據庫檢索,分析髮菜錳過氧化氫酶(Mn-CAT)在榦燥和複吸水後的差異錶達水平,根據Mn-CAT鑒定的已知氨基痠序列設計簡併引物剋隆該基因,併研究其原覈錶達.結果錶明:榦燥髮菜複吸水後Mn-CAT錶達量明顯高于榦燥狀態下的錶達量.使用簡併引物剋隆穫得長度為693 bp的Mn-CAT基因(GenBank登錄號為GU549477).將Mn-CAT基因在大腸桿菌中錶達,穫得1箇約26 kD的外源蛋白,經Western blotting驗證,該外源蛋白為Mn-CAT.研究結果為進一步研究髮菜耐旱的分子機理、探討髮菜對極耑榦旱環境的適應機製奠定瞭基礎.
운용쌍향응효전영기술、MALDI-TOF-TOF/MS질보감정화수거고검색,분석발채맹과양화경매(Mn-CAT)재간조화복흡수후적차이표체수평,근거Mn-CAT감정적이지안기산서렬설계간병인물극륭해기인,병연구기원핵표체.결과표명:간조발채복흡수후Mn-CAT표체량명현고우간조상태하적표체량.사용간병인물극륭획득장도위693 bp적Mn-CAT기인(GenBank등록호위GU549477).장Mn-CAT기인재대장간균중표체,획득1개약26 kD적외원단백,경Western blotting험증,해외원단백위Mn-CAT.연구결과위진일보연구발채내한적분자궤리、탐토발채대겁단간한배경적괄응궤제전정료기출.
