中国普外基础与临床杂志
中國普外基礎與臨床雜誌
중국보외기출여림상잡지
CHINESE JOURNAL OF BASES AND CLINICS IN GENERAL SURGERY
2011年
8期
840-843
,共4页
边学海%赵吉生%张秀英%张纯海%付言涛%赵丽娜%孙辉%郑泽霖
邊學海%趙吉生%張秀英%張純海%付言濤%趙麗娜%孫輝%鄭澤霖
변학해%조길생%장수영%장순해%부언도%조려나%손휘%정택림
甲状腺乳头状癌%原代细胞培养%甲状腺球蛋白%甲状腺过氧化物酶%免疫组织化学
甲狀腺乳頭狀癌%原代細胞培養%甲狀腺毬蛋白%甲狀腺過氧化物酶%免疫組織化學
갑상선유두상암%원대세포배양%갑상선구단백%갑상선과양화물매%면역조직화학
目的 探索人甲状腺乳头状癌原代细胞的体外长期培养方法及其监测鉴定手段.方法 常规分离甲状腺乳头状癌细胞,并用含10%胎牛血清、L-谷氨酰胺和20 ng/ml人重组表皮生长因子(EGF)的高糖型DMEM培养液培养,分别在不同时间观察甲状腺乳头状癌细胞生长情况,测定培养液中的甲状腺球蛋白(Tg)和甲状腺过氧化物酶(TPO)水平,用免疫细胞化学方法检测Tg的表达.结果 培养约8 d甲状腺乳头状癌细胞长满约80%的培养瓶底,符合传代标准;在培养45 d内生长良好,经5～6传代后细胞逐渐老化.细胞培养液中Tg含量随培养时间延长呈抛物线形变化,培养约14 d Tg达到峰值(985.2 μg/L);TPO在细胞培养液中始终未检测到.免疫荧光染色结果显示,体外培养甲状腺乳头状癌原代细胞的Tg表达阳性.绪论应用本研究建立的培养条件可以使人甲状腺乳头状癌原代细胞传5～6代,细胞存活约45 d.建立了简便、系统的监测及鉴定甲状腺乳头状癌细胞生物活性手段,提示在14 d左右该细胞用于基凶研究较为合适,为研究甲状腺乳头状癌发生、发展机理及其特征提供了一种合适替代工具.
目的 探索人甲狀腺乳頭狀癌原代細胞的體外長期培養方法及其鑑測鑒定手段.方法 常規分離甲狀腺乳頭狀癌細胞,併用含10%胎牛血清、L-穀氨酰胺和20 ng/ml人重組錶皮生長因子(EGF)的高糖型DMEM培養液培養,分彆在不同時間觀察甲狀腺乳頭狀癌細胞生長情況,測定培養液中的甲狀腺毬蛋白(Tg)和甲狀腺過氧化物酶(TPO)水平,用免疫細胞化學方法檢測Tg的錶達.結果 培養約8 d甲狀腺乳頭狀癌細胞長滿約80%的培養瓶底,符閤傳代標準;在培養45 d內生長良好,經5～6傳代後細胞逐漸老化.細胞培養液中Tg含量隨培養時間延長呈拋物線形變化,培養約14 d Tg達到峰值(985.2 μg/L);TPO在細胞培養液中始終未檢測到.免疫熒光染色結果顯示,體外培養甲狀腺乳頭狀癌原代細胞的Tg錶達暘性.緒論應用本研究建立的培養條件可以使人甲狀腺乳頭狀癌原代細胞傳5～6代,細胞存活約45 d.建立瞭簡便、繫統的鑑測及鑒定甲狀腺乳頭狀癌細胞生物活性手段,提示在14 d左右該細胞用于基兇研究較為閤適,為研究甲狀腺乳頭狀癌髮生、髮展機理及其特徵提供瞭一種閤適替代工具.
목적 탐색인갑상선유두상암원대세포적체외장기배양방법급기감측감정수단.방법 상규분리갑상선유두상암세포,병용함10%태우혈청、L-곡안선알화20 ng/ml인중조표피생장인자(EGF)적고당형DMEM배양액배양,분별재불동시간관찰갑상선유두상암세포생장정황,측정배양액중적갑상선구단백(Tg)화갑상선과양화물매(TPO)수평,용면역세포화학방법검측Tg적표체.결과 배양약8 d갑상선유두상암세포장만약80%적배양병저,부합전대표준;재배양45 d내생장량호,경5～6전대후세포축점노화.세포배양액중Tg함량수배양시간연장정포물선형변화,배양약14 d Tg체도봉치(985.2 μg/L);TPO재세포배양액중시종미검측도.면역형광염색결과현시,체외배양갑상선유두상암원대세포적Tg표체양성.서론응용본연구건립적배양조건가이사인갑상선유두상암원대세포전5～6대,세포존활약45 d.건립료간편、계통적감측급감정갑상선유두상암세포생물활성수단,제시재14 d좌우해세포용우기흉연구교위합괄,위연구갑상선유두상암발생、발전궤리급기특정제공료일충합괄체대공구.
