中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2011年
5期
983-991
,共9页
杨大佐%周一兵%陈雪%周笑孝%王斌%袁秀堂%孙静波
楊大佐%週一兵%陳雪%週笑孝%王斌%袁秀堂%孫靜波
양대좌%주일병%진설%주소효%왕빈%원수당%손정파
双齿围沙蚕%MPⅡcDNA%RACE%Cd2+%real-time PCR
雙齒圍沙蠶%MPⅡcDNA%RACE%Cd2+%real-time PCR
쌍치위사잠%MPⅡcDNA%RACE%Cd2+%real-time PCR
根据已知杂色沙蚕(Nereis diversicolor)金属结合蛋白Ⅱ (MP Ⅱ)部分基因序列设计引物,应用RACE技术从双齿围沙蚕(Perinereis aibuhitensis)中克隆得到MP ⅡcDNA序列全长为904 bp,其中,开放阅读框为357 bp,编码119个氨基酸.Blast比对结果显示,由双齿围沙蚕MP ⅡcDNA序列推导的氨基酸序列与多毛类Periserrula leucophryna 蚯蚓血红蛋白(Hr)、杂色沙蚕(Nereis diversicolor)蚯蚓肌血红蛋白(MHr)及星虫类Themiste zostericola Hr氨基酸序列的同源性分别为81.51%、77.12%和61.02%,由此推断该cDNA序列可能属于血红蛋白家族.应用Real-time PCR方法,分别研究了沙蚕暴露于Cd2+质量浓度为40 mg/L的环境中12、24、48和72 h后MPⅡ基因表达水平的变化,以及3种质量浓度5、10和20 mg/L Cd2+暴露15 d后MPⅡ基因的表达水平.实验结果表明:(1)沙蚕暴露于40mg/LCd2+ 72 h后,MP ⅡmRNA表达量显著增加,为空白对照组的12.6倍,表现出极显著差异(P<0.01);(2)不同质量浓度Cd2+诱导15d后,各组MP ⅡmRNA表达量均呈显著升高(P<0.05),达到空白对照组的4.8倍以上,且随Cd2+浓度增大,MP ⅡmRNA表达量增加.据此认为,MP Ⅱ对Cd2+的应激调控发生于转录水平.本研究为海洋沉积环境早期污染的生态风险预测提供了分子生物学依据.
根據已知雜色沙蠶(Nereis diversicolor)金屬結閤蛋白Ⅱ (MP Ⅱ)部分基因序列設計引物,應用RACE技術從雙齒圍沙蠶(Perinereis aibuhitensis)中剋隆得到MP ⅡcDNA序列全長為904 bp,其中,開放閱讀框為357 bp,編碼119箇氨基痠.Blast比對結果顯示,由雙齒圍沙蠶MP ⅡcDNA序列推導的氨基痠序列與多毛類Periserrula leucophryna 蚯蚓血紅蛋白(Hr)、雜色沙蠶(Nereis diversicolor)蚯蚓肌血紅蛋白(MHr)及星蟲類Themiste zostericola Hr氨基痠序列的同源性分彆為81.51%、77.12%和61.02%,由此推斷該cDNA序列可能屬于血紅蛋白傢族.應用Real-time PCR方法,分彆研究瞭沙蠶暴露于Cd2+質量濃度為40 mg/L的環境中12、24、48和72 h後MPⅡ基因錶達水平的變化,以及3種質量濃度5、10和20 mg/L Cd2+暴露15 d後MPⅡ基因的錶達水平.實驗結果錶明:(1)沙蠶暴露于40mg/LCd2+ 72 h後,MP ⅡmRNA錶達量顯著增加,為空白對照組的12.6倍,錶現齣極顯著差異(P<0.01);(2)不同質量濃度Cd2+誘導15d後,各組MP ⅡmRNA錶達量均呈顯著升高(P<0.05),達到空白對照組的4.8倍以上,且隨Cd2+濃度增大,MP ⅡmRNA錶達量增加.據此認為,MP Ⅱ對Cd2+的應激調控髮生于轉錄水平.本研究為海洋沉積環境早期汙染的生態風險預測提供瞭分子生物學依據.
근거이지잡색사잠(Nereis diversicolor)금속결합단백Ⅱ (MP Ⅱ)부분기인서렬설계인물,응용RACE기술종쌍치위사잠(Perinereis aibuhitensis)중극륭득도MP ⅡcDNA서렬전장위904 bp,기중,개방열독광위357 bp,편마119개안기산.Blast비대결과현시,유쌍치위사잠MP ⅡcDNA서렬추도적안기산서렬여다모류Periserrula leucophryna 구인혈홍단백(Hr)、잡색사잠(Nereis diversicolor)구인기혈홍단백(MHr)급성충류Themiste zostericola Hr안기산서렬적동원성분별위81.51%、77.12%화61.02%,유차추단해cDNA서렬가능속우혈홍단백가족.응용Real-time PCR방법,분별연구료사잠폭로우Cd2+질량농도위40 mg/L적배경중12、24、48화72 h후MPⅡ기인표체수평적변화,이급3충질량농도5、10화20 mg/L Cd2+폭로15 d후MPⅡ기인적표체수평.실험결과표명:(1)사잠폭로우40mg/LCd2+ 72 h후,MP ⅡmRNA표체량현저증가,위공백대조조적12.6배,표현출겁현저차이(P<0.01);(2)불동질량농도Cd2+유도15d후,각조MP ⅡmRNA표체량균정현저승고(P<0.05),체도공백대조조적4.8배이상,차수Cd2+농도증대,MP ⅡmRNA표체량증가.거차인위,MP Ⅱ대Cd2+적응격조공발생우전록수평.본연구위해양침적배경조기오염적생태풍험예측제공료분자생물학의거.