眼科研究
眼科研究
안과연구
CHINESE OPHTHALMIC RESEARCH
2010年
6期
501-506
,共6页
王丹丹%朱忠欣%蔡军勇%金利泰%丛维涛%赵云娥
王丹丹%硃忠訢%蔡軍勇%金利泰%叢維濤%趙雲娥
왕단단%주충흔%채군용%금리태%총유도%조운아
白内障%蛋白质组%水溶性蛋白%尿溶性蛋白%二维电泳
白內障%蛋白質組%水溶性蛋白%尿溶性蛋白%二維電泳
백내장%단백질조%수용성단백%뇨용성단백%이유전영
目的 研究年龄相关性白内障晶状体核不同组分晶状体蛋白的组成.方法 取12例年龄相关性白内障晶状体软核,提取晶状体核中的水溶性蛋白及尿溶性蛋白进行二维电泳及UPD-蛋白质染料染色试剂盒对凝胶染色后,用Image Master 2D Platinum 6.0软件对获得的蛋白图谱进行分析,再利用MALDI-TOF MS分析及数据库搜索对差异表达的蛋白质点进行鉴定.结果 二维电泳结果显示,年龄相关性白内障晶状体核中水溶性蛋白和尿溶性蛋白大部分为相对分子质量14 400~97 400,pI 5~9.高丰度蛋白质斑点相对分子质量分布在20 000~31 000,pI 6~8区域内.年龄相关性白内障晶状体核水溶性蛋白二维电泳图识别出31个蛋白质斑点,尿溶性蛋白二维电泳图识别出26个蛋白质斑点,相差2倍以上表达的差异点有14个.对选取的蛋白质斑点进行MALDI-TOF MS分析,经数据库检索后鉴定出6种蛋白质,其中3种蛋白质表达下调(γS-晶状体蛋白、βA3-晶状体蛋白、βA4-晶状体蛋白),1种蛋白质表达上调(βB1-晶状体蛋白),2种蛋白质表达缺失(截取的人βB1-晶状体蛋白A链、截取的人γD-晶状体蛋白X链).结论 年龄相关性白内障晶状体核不同组分晶状体蛋白中主要由β-晶状体蛋白组成,与尿溶性晶状体蛋白相比,水溶性蛋白鉴定出γD-晶状体蛋白,而βA4-晶状体蛋白阙如.
目的 研究年齡相關性白內障晶狀體覈不同組分晶狀體蛋白的組成.方法 取12例年齡相關性白內障晶狀體軟覈,提取晶狀體覈中的水溶性蛋白及尿溶性蛋白進行二維電泳及UPD-蛋白質染料染色試劑盒對凝膠染色後,用Image Master 2D Platinum 6.0軟件對穫得的蛋白圖譜進行分析,再利用MALDI-TOF MS分析及數據庫搜索對差異錶達的蛋白質點進行鑒定.結果 二維電泳結果顯示,年齡相關性白內障晶狀體覈中水溶性蛋白和尿溶性蛋白大部分為相對分子質量14 400~97 400,pI 5~9.高豐度蛋白質斑點相對分子質量分佈在20 000~31 000,pI 6~8區域內.年齡相關性白內障晶狀體覈水溶性蛋白二維電泳圖識彆齣31箇蛋白質斑點,尿溶性蛋白二維電泳圖識彆齣26箇蛋白質斑點,相差2倍以上錶達的差異點有14箇.對選取的蛋白質斑點進行MALDI-TOF MS分析,經數據庫檢索後鑒定齣6種蛋白質,其中3種蛋白質錶達下調(γS-晶狀體蛋白、βA3-晶狀體蛋白、βA4-晶狀體蛋白),1種蛋白質錶達上調(βB1-晶狀體蛋白),2種蛋白質錶達缺失(截取的人βB1-晶狀體蛋白A鏈、截取的人γD-晶狀體蛋白X鏈).結論 年齡相關性白內障晶狀體覈不同組分晶狀體蛋白中主要由β-晶狀體蛋白組成,與尿溶性晶狀體蛋白相比,水溶性蛋白鑒定齣γD-晶狀體蛋白,而βA4-晶狀體蛋白闕如.
목적 연구년령상관성백내장정상체핵불동조분정상체단백적조성.방법 취12례년령상관성백내장정상체연핵,제취정상체핵중적수용성단백급뇨용성단백진행이유전영급UPD-단백질염료염색시제합대응효염색후,용Image Master 2D Platinum 6.0연건대획득적단백도보진행분석,재이용MALDI-TOF MS분석급수거고수색대차이표체적단백질점진행감정.결과 이유전영결과현시,년령상관성백내장정상체핵중수용성단백화뇨용성단백대부분위상대분자질량14 400~97 400,pI 5~9.고봉도단백질반점상대분자질량분포재20 000~31 000,pI 6~8구역내.년령상관성백내장정상체핵수용성단백이유전영도식별출31개단백질반점,뇨용성단백이유전영도식별출26개단백질반점,상차2배이상표체적차이점유14개.대선취적단백질반점진행MALDI-TOF MS분석,경수거고검색후감정출6충단백질,기중3충단백질표체하조(γS-정상체단백、βA3-정상체단백、βA4-정상체단백),1충단백질표체상조(βB1-정상체단백),2충단백질표체결실(절취적인βB1-정상체단백A련、절취적인γD-정상체단백X련).결론 년령상관성백내장정상체핵불동조분정상체단백중주요유β-정상체단백조성,여뇨용성정상체단백상비,수용성단백감정출γD-정상체단백,이βA4-정상체단백궐여.