南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2003年
4期
30-35
,共6页
董宏平%彭建令%余晓江%赵静%王颖%董汉松
董宏平%彭建令%餘曉江%趙靜%王穎%董漢鬆
동굉평%팽건령%여효강%조정%왕영%동한송
植物抗病性信号传导%调控基因%克隆%表达谱%半定量RT-PCR
植物抗病性信號傳導%調控基因%剋隆%錶達譜%半定量RT-PCR
식물항병성신호전도%조공기인%극륭%표체보%반정량RT-PCR
建立了从不同植物中克隆抗病性信号传导调控基因及检测其表达的方法,并优化了相关条件.用RT-PCR和PCR方法从拟南芥、烟草、番茄、中华鳖中克隆了7个信号传导通路中18个调控基因的cDNA和DNA序列,它们分别是:抗病基因Pto介导的蛋白激酶级联中的Pti4、Pti5和Pti6,细胞编程死亡通路中的Hin1和hsr203,水杨酸介导的系统性获得抗病性通路中的NPR1,乙烯信号通路中的ETR1、ERS1、CTR1、EIN2和ERF1,茉莉酸信号通路中的COI1,核黄素信号通路中的RFBP和LR,脱落酸信号通路中的ABF3、ABF4和ABH1,以及调控不同信号通路的通调基因NDR1.进一步研究了这些基因表达的定量测定方法:用细菌激发子harpinEa处理植物,提取RNA作为cDNA第1链合成的模板,以在真核生物中广泛同源和高度保守的细胞伸长翻译因子基因EF1α为内参,用半定量RT-PCR法测定基因mRNA的积累,可以比较准确地检测不同基因的相对表达水平.
建立瞭從不同植物中剋隆抗病性信號傳導調控基因及檢測其錶達的方法,併優化瞭相關條件.用RT-PCR和PCR方法從擬南芥、煙草、番茄、中華鱉中剋隆瞭7箇信號傳導通路中18箇調控基因的cDNA和DNA序列,它們分彆是:抗病基因Pto介導的蛋白激酶級聯中的Pti4、Pti5和Pti6,細胞編程死亡通路中的Hin1和hsr203,水楊痠介導的繫統性穫得抗病性通路中的NPR1,乙烯信號通路中的ETR1、ERS1、CTR1、EIN2和ERF1,茉莉痠信號通路中的COI1,覈黃素信號通路中的RFBP和LR,脫落痠信號通路中的ABF3、ABF4和ABH1,以及調控不同信號通路的通調基因NDR1.進一步研究瞭這些基因錶達的定量測定方法:用細菌激髮子harpinEa處理植物,提取RNA作為cDNA第1鏈閤成的模闆,以在真覈生物中廣汎同源和高度保守的細胞伸長翻譯因子基因EF1α為內參,用半定量RT-PCR法測定基因mRNA的積纍,可以比較準確地檢測不同基因的相對錶達水平.
건립료종불동식물중극륭항병성신호전도조공기인급검측기표체적방법,병우화료상관조건.용RT-PCR화PCR방법종의남개、연초、번가、중화별중극륭료7개신호전도통로중18개조공기인적cDNA화DNA서렬,타문분별시:항병기인Pto개도적단백격매급련중적Pti4、Pti5화Pti6,세포편정사망통로중적Hin1화hsr203,수양산개도적계통성획득항병성통로중적NPR1,을희신호통로중적ETR1、ERS1、CTR1、EIN2화ERF1,말리산신호통로중적COI1,핵황소신호통로중적RFBP화LR,탈락산신호통로중적ABF3、ABF4화ABH1,이급조공불동신호통로적통조기인NDR1.진일보연구료저사기인표체적정량측정방법:용세균격발자harpinEa처리식물,제취RNA작위cDNA제1련합성적모판,이재진핵생물중엄범동원화고도보수적세포신장번역인자기인EF1α위내삼,용반정량RT-PCR법측정기인mRNA적적루,가이비교준학지검측불동기인적상대표체수평.
