中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2004年
3期
271-275
,共5页
吴海峰%白俊杰%劳海华%叶星%简清%罗建仁
吳海峰%白俊傑%勞海華%葉星%簡清%囉建仁
오해봉%백준걸%로해화%협성%간청%라건인
鳜鱼%Mx蛋白%RACE%全长cDNA%序列分析
鱖魚%Mx蛋白%RACE%全長cDNA%序列分析
궐어%Mx단백%RACE%전장cDNA%서렬분석
Mx蛋白是一类由I型干扰素诱导表达的抗病毒蛋白.本研究以感染了鳜传染性脾肾坏死病毒(Infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)的鳜鱼为材料,提取肝脏总RNA,通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出Mx蛋白基因的核心片段序列,再应用3'和5'快速扩增cDNA末端(RACE)方法PCR扩增Mx蛋白cDNA末端,最终获得鳜鱼Mx蛋白cDNA序列(GenBank登陆号:AY392097).序列分析表明:鳜鱼Mx蛋白cDNA含有2391bp,其中编码区长1881bp,编码627个氨基酸残基,推测蛋白质分子量大小为7.15kDa.鳜鱼Mx蛋白具有脊椎动物Mx蛋白共有的结构特征:一个三联体GTP结合区域(GXXXSGKS/T、DXXG、T/NKXD);一个发动蛋白家族的典型结构特征序列(LPRGS/KGIVTR);以及C端高度保守的Leu拉链结构域.鳜鱼Mx蛋白全基因的获得为下一步研究鱼类Mx蛋白的抗病毒活性、作用机制,以及干扰素的检测奠定了基础.
Mx蛋白是一類由I型榦擾素誘導錶達的抗病毒蛋白.本研究以感染瞭鱖傳染性脾腎壞死病毒(Infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)的鱖魚為材料,提取肝髒總RNA,通過逆轉錄-聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)擴增齣Mx蛋白基因的覈心片段序列,再應用3'和5'快速擴增cDNA末耑(RACE)方法PCR擴增Mx蛋白cDNA末耑,最終穫得鱖魚Mx蛋白cDNA序列(GenBank登陸號:AY392097).序列分析錶明:鱖魚Mx蛋白cDNA含有2391bp,其中編碼區長1881bp,編碼627箇氨基痠殘基,推測蛋白質分子量大小為7.15kDa.鱖魚Mx蛋白具有脊椎動物Mx蛋白共有的結構特徵:一箇三聯體GTP結閤區域(GXXXSGKS/T、DXXG、T/NKXD);一箇髮動蛋白傢族的典型結構特徵序列(LPRGS/KGIVTR);以及C耑高度保守的Leu拉鏈結構域.鱖魚Mx蛋白全基因的穫得為下一步研究魚類Mx蛋白的抗病毒活性、作用機製,以及榦擾素的檢測奠定瞭基礎.
Mx단백시일류유I형간우소유도표체적항병독단백.본연구이감염료궐전염성비신배사병독(Infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)적궐어위재료,제취간장총RNA,통과역전록-취합매련식반응(RT-PCR)확증출Mx단백기인적핵심편단서렬,재응용3'화5'쾌속확증cDNA말단(RACE)방법PCR확증Mx단백cDNA말단,최종획득궐어Mx단백cDNA서렬(GenBank등륙호:AY392097).서렬분석표명:궐어Mx단백cDNA함유2391bp,기중편마구장1881bp,편마627개안기산잔기,추측단백질분자량대소위7.15kDa.궐어Mx단백구유척추동물Mx단백공유적결구특정:일개삼련체GTP결합구역(GXXXSGKS/T、DXXG、T/NKXD);일개발동단백가족적전형결구특정서렬(LPRGS/KGIVTR);이급C단고도보수적Leu랍련결구역.궐어Mx단백전기인적획득위하일보연구어류Mx단백적항병독활성、작용궤제,이급간우소적검측전정료기출.