细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2005年
2期
133-136
,共4页
王树军%王颖%张惠珍%金姝%沈天伟%葛瑜%葛海良
王樹軍%王穎%張惠珍%金姝%瀋天偉%葛瑜%葛海良
왕수군%왕영%장혜진%금주%침천위%갈유%갈해량
软骨细胞%FasL基因%逆转录病毒载体%表达%猪
軟骨細胞%FasL基因%逆轉錄病毒載體%錶達%豬
연골세포%FasL기인%역전록병독재체%표체%저
目的: 实现猪Fas配体(FasL)基因在猪软骨细胞中表达和鉴定.方法: 用RT-PCR扩增猪FasL基因片段, 构建重组pGCEN-FasL逆转录病毒载体, 并转染PA317细胞.经G418筛选获得高滴度的病毒液, 感染猪软骨细胞, 应用FACS和Western blot检测软骨细胞上FasL的表达.结果: 经酶切分析、测序证明, 成功地构建pGCEN-FasL逆转录病毒载体.转染的软骨细胞表面FasL的表达率为57%.Western blot显示, 在Mr为37 000处有1条特异性蛋白带, 具有诱导Fas +细胞凋亡的作用.结论: 成功地构建重组猪FasL基因的逆转录病毒载体, 并在转染的软骨细胞上高表达具有生物学活性的FasL, 为建立同种异体软骨细胞移植的免疫耐受提供了实验依据.
目的: 實現豬Fas配體(FasL)基因在豬軟骨細胞中錶達和鑒定.方法: 用RT-PCR擴增豬FasL基因片段, 構建重組pGCEN-FasL逆轉錄病毒載體, 併轉染PA317細胞.經G418篩選穫得高滴度的病毒液, 感染豬軟骨細胞, 應用FACS和Western blot檢測軟骨細胞上FasL的錶達.結果: 經酶切分析、測序證明, 成功地構建pGCEN-FasL逆轉錄病毒載體.轉染的軟骨細胞錶麵FasL的錶達率為57%.Western blot顯示, 在Mr為37 000處有1條特異性蛋白帶, 具有誘導Fas +細胞凋亡的作用.結論: 成功地構建重組豬FasL基因的逆轉錄病毒載體, 併在轉染的軟骨細胞上高錶達具有生物學活性的FasL, 為建立同種異體軟骨細胞移植的免疫耐受提供瞭實驗依據.
목적: 실현저Fas배체(FasL)기인재저연골세포중표체화감정.방법: 용RT-PCR확증저FasL기인편단, 구건중조pGCEN-FasL역전록병독재체, 병전염PA317세포.경G418사선획득고적도적병독액, 감염저연골세포, 응용FACS화Western blot검측연골세포상FasL적표체.결과: 경매절분석、측서증명, 성공지구건pGCEN-FasL역전록병독재체.전염적연골세포표면FasL적표체솔위57%.Western blot현시, 재Mr위37 000처유1조특이성단백대, 구유유도Fas +세포조망적작용.결론: 성공지구건중조저FasL기인적역전록병독재체, 병재전염적연골세포상고표체구유생물학활성적FasL, 위건립동충이체연골세포이식적면역내수제공료실험의거.
