江西医学院学报
江西醫學院學報
강서의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE JIANGXI
2005年
6期
8-11
,共4页
易敬林%钟文贤%杨海军%钟琳娜
易敬林%鐘文賢%楊海軍%鐘琳娜
역경림%종문현%양해군%종림나
角膜缘%干细胞%培养%深低温保存
角膜緣%榦細胞%培養%深低溫保存
각막연%간세포%배양%심저온보존
目的探寻深低温保存兔角膜缘干细胞的体外培养方法.方法将2 mm宽的兔角巩膜组织通过程序降温仪降温后置于-196 ℃液氮中深低温保存.1年后复温,应用消化培养法分别对冻存及新鲜的兔角膜缘干细胞进行体外培养,观察并记录细胞生长情况,HE染色观察培养细胞的形态特征.结果经过深低温保存的兔角膜缘干细胞可以在体外被成功培养并传代,其在原代培养48h后开始贴壁生长,5 d后生长较旺盛,但可见部分破裂和死亡细胞,约12 d基本形成单层;传代培养时次日贴壁,7 d形成单层.新鲜兔角膜缘干细胞原代培养时细胞形态相似,但破碎死亡细胞少见,且于7 d左右即基本形成单层,传代时两者无明显差别.结论深低温保存的角膜缘干细胞能被成功地进行体外培养,培养后细胞具有与培养的新鲜角膜缘干细胞基本相似的特性,为深低温保存的角膜缘干细胞培养后移植治疗临床眼表疾病提供了实验依据,并为眼库技术的发挥开辟了新的应用途径.
目的探尋深低溫保存兔角膜緣榦細胞的體外培養方法.方法將2 mm寬的兔角鞏膜組織通過程序降溫儀降溫後置于-196 ℃液氮中深低溫保存.1年後複溫,應用消化培養法分彆對凍存及新鮮的兔角膜緣榦細胞進行體外培養,觀察併記錄細胞生長情況,HE染色觀察培養細胞的形態特徵.結果經過深低溫保存的兔角膜緣榦細胞可以在體外被成功培養併傳代,其在原代培養48h後開始貼壁生長,5 d後生長較旺盛,但可見部分破裂和死亡細胞,約12 d基本形成單層;傳代培養時次日貼壁,7 d形成單層.新鮮兔角膜緣榦細胞原代培養時細胞形態相似,但破碎死亡細胞少見,且于7 d左右即基本形成單層,傳代時兩者無明顯差彆.結論深低溫保存的角膜緣榦細胞能被成功地進行體外培養,培養後細胞具有與培養的新鮮角膜緣榦細胞基本相似的特性,為深低溫保存的角膜緣榦細胞培養後移植治療臨床眼錶疾病提供瞭實驗依據,併為眼庫技術的髮揮開闢瞭新的應用途徑.
목적탐심심저온보존토각막연간세포적체외배양방법.방법장2 mm관적토각공막조직통과정서강온의강온후치우-196 ℃액담중심저온보존.1년후복온,응용소화배양법분별대동존급신선적토각막연간세포진행체외배양,관찰병기록세포생장정황,HE염색관찰배양세포적형태특정.결과경과심저온보존적토각막연간세포가이재체외피성공배양병전대,기재원대배양48h후개시첩벽생장,5 d후생장교왕성,단가견부분파렬화사망세포,약12 d기본형성단층;전대배양시차일첩벽,7 d형성단층.신선토각막연간세포원대배양시세포형태상사,단파쇄사망세포소견,차우7 d좌우즉기본형성단층,전대시량자무명현차별.결론심저온보존적각막연간세포능피성공지진행체외배양,배양후세포구유여배양적신선각막연간세포기본상사적특성,위심저온보존적각막연간세포배양후이식치료림상안표질병제공료실험의거,병위안고기술적발휘개벽료신적응용도경.
