中国现代医学杂志
中國現代醫學雜誌
중국현대의학잡지
CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE
2006年
9期
1341-1344
,共4页
大肠癌%嵌合抗体%真核表达
大腸癌%嵌閤抗體%真覈錶達
대장암%감합항체%진핵표체
目的在CHO细胞中高效表达抗人大肠癌HCAb人-鼠嵌合抗体.方法从分泌鼠源单抗CAb的杂交瘤细胞中克隆、扩增可变区基因,测序鉴定后连入真核表达载体,转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢(dihydrofolate reductase-deficient Chinese hamster ovary,CHO-dhfr-)细胞进行表达.经G418及氨甲喋呤(MTX)梯度加压筛选进行嵌合抗体的高效表达,并用夹心ELISA方法测定嵌合抗体表达产量.结果采用RT-pCR、夹心ELISA等实验证实了所表达的抗人大肠癌HCAb嵌合抗体的人源性.培养上清中的抗体产量可达20mg/L.结论成功的实现了抗人大肠癌HCAb人-鼠嵌合抗体在CHO细胞中高效表达,为其进一步在大肠癌临床诊治中的应用奠定了基础.
目的在CHO細胞中高效錶達抗人大腸癌HCAb人-鼠嵌閤抗體.方法從分泌鼠源單抗CAb的雜交瘤細胞中剋隆、擴增可變區基因,測序鑒定後連入真覈錶達載體,轉染二氫葉痠還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢(dihydrofolate reductase-deficient Chinese hamster ovary,CHO-dhfr-)細胞進行錶達.經G418及氨甲喋呤(MTX)梯度加壓篩選進行嵌閤抗體的高效錶達,併用夾心ELISA方法測定嵌閤抗體錶達產量.結果採用RT-pCR、夾心ELISA等實驗證實瞭所錶達的抗人大腸癌HCAb嵌閤抗體的人源性.培養上清中的抗體產量可達20mg/L.結論成功的實現瞭抗人大腸癌HCAb人-鼠嵌閤抗體在CHO細胞中高效錶達,為其進一步在大腸癌臨床診治中的應用奠定瞭基礎.
목적재CHO세포중고효표체항인대장암HCAb인-서감합항체.방법종분비서원단항CAb적잡교류세포중극륭、확증가변구기인,측서감정후련입진핵표체재체,전염이경협산환원매결함형중국창서란소(dihydrofolate reductase-deficient Chinese hamster ovary,CHO-dhfr-)세포진행표체.경G418급안갑첩령(MTX)제도가압사선진행감합항체적고효표체,병용협심ELISA방법측정감합항체표체산량.결과채용RT-pCR、협심ELISA등실험증실료소표체적항인대장암HCAb감합항체적인원성.배양상청중적항체산량가체20mg/L.결론성공적실현료항인대장암HCAb인-서감합항체재CHO세포중고효표체,위기진일보재대장암림상진치중적응용전정료기출.
