CAJ | 학술논문

目的:应用治疗性肝再生模型进行胚胎干细胞(ESC)源性肝干细胞肝内移植,观察其在肝组织替代、体内的生长分化及成瘤性等情况,为ESC移植在难治性肝病治疗中的临床应用提供实验依据.方法:倒千里光碱+70%肝部分切除建立BALB/c小鼠的治疗性肝再生模型.用荧光示踪剂CFDA SE标记移植细胞,将经淤胆血清"病理微环境"筛选体系筛选出的ESC源性肝干细胞经门静脉移植入治疗性肝再生模型小鼠肝内.然后荧光显微镜下观察,检测移植细胞体内分布、整合与肝细胞替代、体内生长分化等情况.2周后行白蛋白荧光免疫组化(双荧光染色)、血清白蛋白水平检测其功能状况.并通过观察其体内成瘤性对筛选出的ESC源性肝干细胞的安全性进行评估.结果:CFDA SE标记的ESC源性肝干细胞肝内移植1周,受体小鼠肝实质内可见散在绿色荧光分布.2周后,肝实质内绿色荧光分布区域明显扩大,且可见类似肝索样结构排列.共焦白蛋白荧光免疫组化(双荧光染色)结果表明,受体小鼠肝组织内可见标记细胞表达白蛋白阳性信号(呈黄色荧光),血清白蛋白水平则无明显差异(P＞0.05).6周内未见畸胎瘤形成,而将未分化的ESC移植入小鼠腋区皮下6周后则可见畸胎瘤形成.结论:经淤胆血清"病理微环境"筛选体系筛选出的ESC源性肝干细胞移植入治疗性肝再生模型小鼠肝内后可有效整合入宿主肝板、在肝内能进一步生长分化并部分表达肝细胞功能.其安全性较好,6周内未见畸胎瘤形成.
목적:응용치료성간재생모형진행배태간세포(ESC)원성간간세포간내이식,관찰기재간조직체대、체내적생장분화급성류성등정황,위ESC이식재난치성간병치료중적림상응용제공실험의거.방법:도천리광감+70%간부분절제건립BALB/c소서적치료성간재생모형.용형광시종제CFDA SE표기이식세포,장경어담혈청"병리미배경"사선체계사선출적ESC원성간간세포경문정맥이식입치료성간재생모형소서간내.연후형광현미경하관찰,검측이식세포체내분포、정합여간세포체대、체내생장분화등정황.2주후행백단백형광면역조화(쌍형광염색)、혈청백단백수평검측기공능상황.병통과관찰기체내성류성대사선출적ESC원성간간세포적안전성진행평고.결과:CFDA SE표기적ESC원성간간세포간내이식1주,수체소서간실질내가견산재록색형광분포.2주후,간실질내록색형광분포구역명현확대,차가견유사간색양결구배렬.공초백단백형광면역조화(쌍형광염색)결과표명,수체소서간조직내가견표기세포표체백단백양성신호(정황색형광),혈청백단백수평칙무명현차이(P＞0.05).6주내미견기태류형성,이장미분화적ESC이식입소서액구피하6주후칙가견기태류형성.결론:경어담혈청"병리미배경"사선체계사선출적ESC원성간간세포이식입치료성간재생모형소서간내후가유효정합입숙주간판、재간내능진일보생장분화병부분표체간세포공능.기안전성교호,6주내미견기태류형성.