基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2007年
12期
1365-1369
,共5页
刘黎明%陈昌杰%陈正徐%段光军%胡华成
劉黎明%陳昌傑%陳正徐%段光軍%鬍華成
류려명%진창걸%진정서%단광군%호화성
小干扰RNA%Survivin%肿瘤细胞系%A549细胞
小榦擾RNA%Survivin%腫瘤細胞繫%A549細胞
소간우RNA%Survivin%종류세포계%A549세포
目的 测定Survivin特异小干扰RNA(siRRA)表达载体对肺腺癌细胞A549 Survivin基因表达的抑制及对增殖和凋亡的影响.方法 构建Survivin特异性小干扰RNA表达载体,转染A549细胞,筛选出稳定表达的细胞株.用荧光实时定量反转录聚合酶链反应法、Western blot和免疫组化法检测Survivin基因mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性,流式细胞仪测定细胞凋亡率.结果 经测序鉴定证实成功构建Survivin-siRRA表达载体.Survivin基因mRNA表达量下降76.4%,Western blot显示蛋白表达下降84.5%,免疫组化法也显示Survivin蛋白表达下降.MTT法测定细胞增殖较对照组减慢(P＜0.01),细胞凋亡率较对照组增加8.95%(P＜0.01).结论 Survivin特异siRRA表达载体下调Survivin基因表达,抑制A549细胞的增殖,促进凋亡.
目的 測定Survivin特異小榦擾RNA(siRRA)錶達載體對肺腺癌細胞A549 Survivin基因錶達的抑製及對增殖和凋亡的影響.方法 構建Survivin特異性小榦擾RNA錶達載體,轉染A549細胞,篩選齣穩定錶達的細胞株.用熒光實時定量反轉錄聚閤酶鏈反應法、Western blot和免疫組化法檢測Survivin基因mRNA和蛋白的錶達水平,四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測細胞活性,流式細胞儀測定細胞凋亡率.結果 經測序鑒定證實成功構建Survivin-siRRA錶達載體.Survivin基因mRNA錶達量下降76.4%,Western blot顯示蛋白錶達下降84.5%,免疫組化法也顯示Survivin蛋白錶達下降.MTT法測定細胞增殖較對照組減慢(P＜0.01),細胞凋亡率較對照組增加8.95%(P＜0.01).結論 Survivin特異siRRA錶達載體下調Survivin基因錶達,抑製A549細胞的增殖,促進凋亡.
목적 측정Survivin특이소간우RNA(siRRA)표체재체대폐선암세포A549 Survivin기인표체적억제급대증식화조망적영향.방법 구건Survivin특이성소간우RNA표체재체,전염A549세포,사선출은정표체적세포주.용형광실시정량반전록취합매련반응법、Western blot화면역조화법검측Survivin기인mRNA화단백적표체수평,사갑기우담서람(MTT)법검측세포활성,류식세포의측정세포조망솔.결과 경측서감정증실성공구건Survivin-siRRA표체재체.Survivin기인mRNA표체량하강76.4%,Western blot현시단백표체하강84.5%,면역조화법야현시Survivin단백표체하강.MTT법측정세포증식교대조조감만(P＜0.01),세포조망솔교대조조증가8.95%(P＜0.01).결론 Survivin특이siRRA표체재체하조Survivin기인표체,억제A549세포적증식,촉진조망.
