骨髓间充质干细胞和软骨细胞共培养种子细胞特征及体内成软骨活性
골수간충질간세포화연골세포공배양충자세포특정급체내성연골활성
Characteristics of co-culture of autogenic bone marrow mesenchymal stem cells with chondrocytes as seed cells and in vivo chondrogenic activity
  • 万方数据
    中国组织工程研究与临床康复 중국조직공정연구여림상강복
    JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
    2008年 3期 442-446 ,共5页

    冯万文%莱浙军%李小民%常伶文%徐毓林%张丽%王晓红%何向红%夏亚一%党跃修%吴萌%孙正义%靳白玉%李向东

    풍만문%래절군%리소민%상령문%서육림%장려%왕효홍%하향홍%하아일%당약수%오맹%손정의%근백옥%리향동

    骨髓间充质干细胞%软骨细胞%共培养%种子细胞%脱钙骨基质:关节软骨修复 骨髓間充質榦細胞%軟骨細胞%共培養%種子細胞%脫鈣骨基質:關節軟骨脩複
    골수간충질간세포%연골세포%공배양%충자세포%탈개골기질:관절연골수복
    目的:组织工程技术为解决关节软骨缺损修复这一难题提供了新的思路,但至今尚无一种细胞能完全满足软骨组织工程对种子细胞的要求.探讨以自体骨髓间充质干细胞与软骨细胞共培养为种子细胞修复关节软骨缺损的可行性,并评价修复效果.方法:实验于2005-03/2006-02在兰州大学骨科研究所组织工程实验室和连云港市东方医院骨科实验室完成.①取浓度为3×108 L-1的第2代骨髓间充质干细胞和软骨细胞,按2:1比例混匀共培养作为种子细胞,观察细胞的增殖和基质合成,绘制细胞生长曲线.②将细胞终浓度为3x 108 L-1的共培养细胞加入含有同种异体脱钙骨摹质的24孔培养板中进行接种培养2,4,6 d,计算共培养细胞与脱钙骨基质的黏附率.③取54只青紫兰兔制备全层关节软骨缺损模型,随机分为实验组、脱钙骨基质对照组、空白对照组,每组18只.实验组于软骨缺损处植入同种异体脱钙骨基质与共培养细胞;脱钙骨基质对照组植入脱钙骨基质;空白对照组不作任何植入.移植术后6,12周取出膝关节对修复组织进行大体、组织学评分和免疫组织化学观测.结果:54只青紫兰兔均进入结果分析.①共培养的软骨细胞基质合成丰富,细胞增殖加快.脱钙骨基质与骨髓间充质干细胞和软骨细胞共培养第2,4,6天的黏附率分别为(46.50±1.40)%,(93.25±2.89)%和(88.34±0.76)%.②大体观察结果:实验组缺损修复组织呈软骨样,表面光滑平坦,与周围软骨整合的软骨细胞更为成熟,修复组织与软骨下骨结合牢固.脱钙骨基质对照组、空白对照组的修复组织呈纤维组织和无修复.③组织学评分:实验组优于脱钙骨基质对照组、空白对照组,差异具有显著性意义(P＜0.01),脱钙骨基质对照组与空白对照组比较差异无显著性意义(P＞0.05).④免疫组织化学染色显示实验组修复组织的细胞为透明软骨样细胞,柱状排列,Ⅱ型胶原染色阳性,与周围软骨及软骨下骨整合良好.结论:自体骨髓问充质干细胞与软骨细胞共培养作为种子细胞,骨髓间充质干细胞能增强软骨细胞的增殖,促进软骨细胞基质合成,缩短软骨细胞培养时间和减少传代次数,可节省大量的软骨细胞,与脱钙骨基质复合后能有效修复关节软骨缺损.
    목적:조직공정기술위해결관절연골결손수복저일난제제공료신적사로,단지금상무일충세포능완전만족연골조직공정대충자세포적요구.탐토이자체골수간충질간세포여연골세포공배양위충자세포수복관절연골결손적가행성,병평개수복효과.방법:실험우2005-03/2006-02재란주대학골과연구소조직공정실험실화련운항시동방의원골과실험실완성.①취농도위3×108 L-1적제2대골수간충질간세포화연골세포,안2:1비례혼균공배양작위충자세포,관찰세포적증식화기질합성,회제세포생장곡선.②장세포종농도위3x 108 L-1적공배양세포가입함유동충이체탈개골모질적24공배양판중진행접충배양2,4,6 d,계산공배양세포여탈개골기질적점부솔.③취54지청자란토제비전층관절연골결손모형,수궤분위실험조、탈개골기질대조조、공백대조조,매조18지.실험조우연골결손처식입동충이체탈개골기질여공배양세포;탈개골기질대조조식입탈개골기질;공백대조조불작임하식입.이식술후6,12주취출슬관절대수복조직진행대체、조직학평분화면역조직화학관측.결과:54지청자란토균진입결과분석.①공배양적연골세포기질합성봉부,세포증식가쾌.탈개골기질여골수간충질간세포화연골세포공배양제2,4,6천적점부솔분별위(46.50±1.40)%,(93.25±2.89)%화(88.34±0.76)%.②대체관찰결과:실험조결손수복조직정연골양,표면광활평탄,여주위연골정합적연골세포경위성숙,수복조직여연골하골결합뢰고.탈개골기질대조조、공백대조조적수복조직정섬유조직화무수복.③조직학평분:실험조우우탈개골기질대조조、공백대조조,차이구유현저성의의(P＜0.01),탈개골기질대조조여공백대조조비교차이무현저성의의(P＞0.05).④면역조직화학염색현시실험조수복조직적세포위투명연골양세포,주상배렬,Ⅱ형효원염색양성,여주위연골급연골하골정합량호.결론:자체골수문충질간세포여연골세포공배양작위충자세포,골수간충질간세포능증강연골세포적증식,촉진연골세포기질합성,축단연골세포배양시간화감소전대차수,가절성대량적연골세포,여탈개골기질복합후능유효수복관절연골결손.
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