水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2008年
4期
509-514
,共6页
史燕%赵哲%张义兵%朱新平%石军%张奇亚%桂建芳
史燕%趙哲%張義兵%硃新平%石軍%張奇亞%桂建芳
사연%조철%장의병%주신평%석군%장기아%계건방
IRF1%基因转染%过量表达%多克隆抗体%表达调控
IRF1%基因轉染%過量錶達%多剋隆抗體%錶達調控
IRF1%기인전염%과량표체%다극륭항체%표체조공
将鲫鱼IRF1基因的ORF与真核表达质粒pcDNA3.1(+)相连,构建了真核重组表达载体,转染并通过G418筛选获得了稳定转染IRFI基因的细胞株.同时利用原核表达系统成功获得了包含鲫鱼IRFI C端165个氨基酸的多肽,制备了抗鲫鱼IRF1的多克隆抗体.进一步从RNA和蛋白水平证明,在稳定转染IRFI基因的细胞株中IRF1能够组成型的过量表达,并且IRF1的过量表达伴随IFN基因的表达水平增强.同时PolyI:C的诱导能使稳定表达IRF1的细胞中干扰素系统基因STAT1和IF158的表达显著增强.研究结果表明,过量表达IRFI能调控鲫鱼,IFN以及ISG基因的表达.
將鯽魚IRF1基因的ORF與真覈錶達質粒pcDNA3.1(+)相連,構建瞭真覈重組錶達載體,轉染併通過G418篩選穫得瞭穩定轉染IRFI基因的細胞株.同時利用原覈錶達繫統成功穫得瞭包含鯽魚IRFI C耑165箇氨基痠的多肽,製備瞭抗鯽魚IRF1的多剋隆抗體.進一步從RNA和蛋白水平證明,在穩定轉染IRFI基因的細胞株中IRF1能夠組成型的過量錶達,併且IRF1的過量錶達伴隨IFN基因的錶達水平增彊.同時PolyI:C的誘導能使穩定錶達IRF1的細胞中榦擾素繫統基因STAT1和IF158的錶達顯著增彊.研究結果錶明,過量錶達IRFI能調控鯽魚,IFN以及ISG基因的錶達.
장즉어IRF1기인적ORF여진핵표체질립pcDNA3.1(+)상련,구건료진핵중조표체재체,전염병통과G418사선획득료은정전염IRFI기인적세포주.동시이용원핵표체계통성공획득료포함즉어IRFI C단165개안기산적다태,제비료항즉어IRF1적다극륭항체.진일보종RNA화단백수평증명,재은정전염IRFI기인적세포주중IRF1능구조성형적과량표체,병차IRF1적과량표체반수IFN기인적표체수평증강.동시PolyI:C적유도능사은정표체IRF1적세포중간우소계통기인STAT1화IF158적표체현저증강.연구결과표명,과량표체IRFI능조공즉어,IFN이급ISG기인적표체.
