中国普外基础与临床杂志
中國普外基礎與臨床雜誌
중국보외기출여림상잡지
CHINESE JOURNAL OF BASES AND CLINICS IN GENERAL SURGERY
2010年
7期
699-702
,共4页
徐宏勇%徐立%李开宗%窦科峰
徐宏勇%徐立%李開宗%竇科峰
서굉용%서립%리개종%두과봉
肝细胞癌%单链抗体%原核表达%肿瘤相关糖蛋白-72抗原
肝細胞癌%單鏈抗體%原覈錶達%腫瘤相關糖蛋白-72抗原
간세포암%단련항체%원핵표체%종류상관당단백-72항원
目的 探讨抗肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)单链抗体的原核表达及与4种肝癌细胞系和肝癌组织的特异性亲和力.方法将抗TAG-72单链抗体的cDNA片段插入噬菌粒载体pCANTAB5E, 获得噬菌粒载体TAG-72-scFv-pCANTAB5E.将后者转化入E.coli HB2151, 经β, D异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得抗TAG-72单链抗体蛋白.采用细胞培养及免疫细胞/组织化学方法, 检测4种肝癌细胞系及石蜡包埋的肝癌组织中TAG-72抗原的表达.结果 SDS-PAGE及Western blot法证实, 抗TAG-72单链抗体蛋白分子得以正确表达.抗TAG-72单链抗体可与肝癌细胞系SMMC7721、HepG2和HHCC结合, 表明这3种细胞表达了特异性肿瘤抗原; 抗TAG-72单链抗体不能结合BEL7402细胞.40例肝癌组织中TAG-72抗原表达阳性率Ⅰ期、Ⅱ～Ⅲ期分别为23.08%(3/13)和62.96%(17/27),在正常肝组织标本中无TAG-72抗原表达,TAG-72抗原在正常肝组织及肝癌组织中表达的差异有统计学意义(P<0.05).结论 TAG-72抗原在肝癌细胞或肝癌组织中有特异性表达,有可能成为判断肝癌的标志物.
目的 探討抗腫瘤相關糖蛋白-72(TAG-72)單鏈抗體的原覈錶達及與4種肝癌細胞繫和肝癌組織的特異性親和力.方法將抗TAG-72單鏈抗體的cDNA片段插入噬菌粒載體pCANTAB5E, 穫得噬菌粒載體TAG-72-scFv-pCANTAB5E.將後者轉化入E.coli HB2151, 經β, D異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)誘導錶達穫得抗TAG-72單鏈抗體蛋白.採用細胞培養及免疫細胞/組織化學方法, 檢測4種肝癌細胞繫及石蠟包埋的肝癌組織中TAG-72抗原的錶達.結果 SDS-PAGE及Western blot法證實, 抗TAG-72單鏈抗體蛋白分子得以正確錶達.抗TAG-72單鏈抗體可與肝癌細胞繫SMMC7721、HepG2和HHCC結閤, 錶明這3種細胞錶達瞭特異性腫瘤抗原; 抗TAG-72單鏈抗體不能結閤BEL7402細胞.40例肝癌組織中TAG-72抗原錶達暘性率Ⅰ期、Ⅱ～Ⅲ期分彆為23.08%(3/13)和62.96%(17/27),在正常肝組織標本中無TAG-72抗原錶達,TAG-72抗原在正常肝組織及肝癌組織中錶達的差異有統計學意義(P<0.05).結論 TAG-72抗原在肝癌細胞或肝癌組織中有特異性錶達,有可能成為判斷肝癌的標誌物.
목적 탐토항종류상관당단백-72(TAG-72)단련항체적원핵표체급여4충간암세포계화간암조직적특이성친화력.방법장항TAG-72단련항체적cDNA편단삽입서균립재체pCANTAB5E, 획득서균립재체TAG-72-scFv-pCANTAB5E.장후자전화입E.coli HB2151, 경β, D이병기류대반유당감(IPTG)유도표체획득항TAG-72단련항체단백.채용세포배양급면역세포/조직화학방법, 검측4충간암세포계급석사포매적간암조직중TAG-72항원적표체.결과 SDS-PAGE급Western blot법증실, 항TAG-72단련항체단백분자득이정학표체.항TAG-72단련항체가여간암세포계SMMC7721、HepG2화HHCC결합, 표명저3충세포표체료특이성종류항원; 항TAG-72단련항체불능결합BEL7402세포.40례간암조직중TAG-72항원표체양성솔Ⅰ기、Ⅱ～Ⅲ기분별위23.08%(3/13)화62.96%(17/27),재정상간조직표본중무TAG-72항원표체,TAG-72항원재정상간조직급간암조직중표체적차이유통계학의의(P<0.05).결론 TAG-72항원재간암세포혹간암조직중유특이성표체,유가능성위판단간암적표지물.
