厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2011年
1期
82-87
,共6页
卓山龄%孙金鹏%陈溥%傅成龙%凌雪萍%卢英华
卓山齡%孫金鵬%陳溥%傅成龍%凌雪萍%盧英華
탁산령%손금붕%진부%부성룡%릉설평%로영화
角质细胞生长因子%大肠杆菌BL21(DE3)%表达%高密度培养
角質細胞生長因子%大腸桿菌BL21(DE3)%錶達%高密度培養
각질세포생장인자%대장간균BL21(DE3)%표체%고밀도배양
角质细胞生长因子(KGF)是成纤维生长因子家族(FGF)成员,与上皮细胞增殖、组织胚胎发育、创伤修复等过程密切相关.在大肠杆菌BL21(DE3)中克隆KGF基因,并进行诱导表达条件的优化.使用合成培养基,应用底物反馈流加策略将糖浓度控制在较低水平,在发酵罐中高密度培养,细胞干质量浓度可以达到46g/L.发酵罐培养的大肠杆菌在对数生长期经过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,在可溶性和不溶性产物中都得到了具有免疫学活性的GST-KGF融合蛋白,经过ELISA检测,发酵液中可溶性表达的KGF产率达到108μg/L.该研究为利用原核表达系统生产活性KGF建立了优化工艺,有利于将大规模生产用于创伤修复的KGF.
角質細胞生長因子(KGF)是成纖維生長因子傢族(FGF)成員,與上皮細胞增殖、組織胚胎髮育、創傷脩複等過程密切相關.在大腸桿菌BL21(DE3)中剋隆KGF基因,併進行誘導錶達條件的優化.使用閤成培養基,應用底物反饋流加策略將糖濃度控製在較低水平,在髮酵罐中高密度培養,細胞榦質量濃度可以達到46g/L.髮酵罐培養的大腸桿菌在對數生長期經過異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導,在可溶性和不溶性產物中都得到瞭具有免疫學活性的GST-KGF融閤蛋白,經過ELISA檢測,髮酵液中可溶性錶達的KGF產率達到108μg/L.該研究為利用原覈錶達繫統生產活性KGF建立瞭優化工藝,有利于將大規模生產用于創傷脩複的KGF.
각질세포생장인자(KGF)시성섬유생장인자가족(FGF)성원,여상피세포증식、조직배태발육、창상수복등과정밀절상관.재대장간균BL21(DE3)중극륭KGF기인,병진행유도표체조건적우화.사용합성배양기,응용저물반궤류가책략장당농도공제재교저수평,재발효관중고밀도배양,세포간질량농도가이체도46g/L.발효관배양적대장간균재대수생장기경과이병기-β-D-류대반유당감(IPTG)유도,재가용성화불용성산물중도득도료구유면역학활성적GST-KGF융합단백,경과ELISA검측,발효액중가용성표체적KGF산솔체도108μg/L.해연구위이용원핵표체계통생산활성KGF건립료우화공예,유리우장대규모생산용우창상수복적KGF.
