华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2011年
1期
6-10
,共5页
邬成业%史平玲%乔松林%王爱萍%郝慧芳%杜晓明%王林林%张改平
鄔成業%史平玲%喬鬆林%王愛萍%郝慧芳%杜曉明%王林林%張改平
오성업%사평령%교송림%왕애평%학혜방%두효명%왕림림%장개평
猪FcγRⅢ受体%γ链%共转染%Marc145细胞
豬FcγRⅢ受體%γ鏈%共轉染%Marc145細胞
저FcγRⅢ수체%γ련%공전염%Marc145세포
为了建立稳定表达猪FcγRⅢ (Porcine Fc gamma receptor Ⅲ,poFcγRⅢ )的Marc-145细胞系,从PAM细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅢ和γ链的cDNA,并构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1- FcγRⅢ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300 mg/L)和G418(400 mg/L)共筛选获得稳定表达猪FcγR Ⅲ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环试验和流式细胞术对细胞系进行了鉴定.结果表明,成功构建了猪FcγRⅢ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系,表达于转染细胞表面的猪FcγRⅢ受体分子能与猪IgG特异结合.
為瞭建立穩定錶達豬FcγRⅢ (Porcine Fc gamma receptor Ⅲ,poFcγRⅢ )的Marc-145細胞繫,從PAM細胞中提取總RNA,應用RT-PCR技術穫得豬FcγRⅢ和γ鏈的cDNA,併構建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1- FcγRⅢ真覈錶達質粒;用脂質體共轉染Marc-145細胞,經潮黴素B(300 mg/L)和G418(400 mg/L)共篩選穫得穩定錶達豬FcγR Ⅲ的細胞繫;運用RT-PCR、玫瑰花環試驗和流式細胞術對細胞繫進行瞭鑒定.結果錶明,成功構建瞭豬FcγRⅢ和γ鏈真覈錶達載體,建立瞭穩定錶達豬FcγRⅢ的細胞繫,錶達于轉染細胞錶麵的豬FcγRⅢ受體分子能與豬IgG特異結閤.
위료건립은정표체저FcγRⅢ (Porcine Fc gamma receptor Ⅲ,poFcγRⅢ )적Marc-145세포계,종PAM세포중제취총RNA,응용RT-PCR기술획득저FcγRⅢ화γ련적cDNA,병구건PIREShyg3-γ화pcDNA3.1- FcγRⅢ진핵표체질립;용지질체공전염Marc-145세포,경조매소B(300 mg/L)화G418(400 mg/L)공사선획득은정표체저FcγR Ⅲ적세포계;운용RT-PCR、매괴화배시험화류식세포술대세포계진행료감정.결과표명,성공구건료저FcγRⅢ화γ련진핵표체재체,건립료은정표체저FcγRⅢ적세포계,표체우전염세포표면적저FcγRⅢ수체분자능여저IgG특이결합.
