CAJ | 학술논문

联用胶内差异双向电泳(2D-DIGE)和高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-nESI MS/MS)鉴定人角质形成细胞HaCaT应答中波紫外线(UVB)损伤的差异表达蛋白,筛选UVB影响皮肤细胞正常生理功能潜在的靶标蛋白.结果表明:UVB辐射明显影响HaCaT细胞的蛋白质表达谱,DeCyder软件在每块DIGE凝胶上平均检测到1200多个蛋白斑点,在DIGE检测限以上有显著性表达差异的斑点有41个.HPLC-nESI MS/MS成功鉴定了9个差异表达最显著斑点,4个表达上调斑点被鉴定为26S蛋白酶体亚基p40.5(PSMD13),组织蛋白酶D(CTSD),6-磷酸葡糖酸内酯酶(PGLS),辅分子伴侣23(PTGES3);5个表达下调斑点被鉴定为层粘连蛋白受体1(RPSA),干扰素-γ诱导因子前体(IL18),钙调蛋白(CALM3),60S酸性核糖体蛋白P2类似物(RPP2)和断裂点丛集区蛋白1(BANFI).9个差异表达蛋白中,除RPSA、CALM3和CTSD被报道与皮肤烫伤和创伤修复、角质形成细胞增殖和迁移、表皮障碍修复相关外,其他蛋白与皮肤细胞损伤和皮肤疾患研究未见报道.这些蛋白是UVB辐射直接影响皮肤细胞正常生理功能潜在的蛋白质靶标,为进一步在分子水平研究皮肤疾病有效防护提供了有价值的线索.
련용효내차이쌍향전영(2D-DIGE)화고효액상색보-전분무천련질보(HPLC-nESI MS/MS)감정인각질형성세포HaCaT응답중파자외선(UVB)손상적차이표체단백,사선UVB영향피부세포정상생리공능잠재적파표단백.결과표명:UVB복사명현영향HaCaT세포적단백질표체보,DeCyder연건재매괴DIGE응효상평균검측도1200다개단백반점,재DIGE검측한이상유현저성표체차이적반점유41개.HPLC-nESI MS/MS성공감정료9개차이표체최현저반점,4개표체상조반점피감정위26S단백매체아기p40.5(PSMD13),조직단백매D(CTSD),6-린산포당산내지매(PGLS),보분자반려23(PTGES3);5개표체하조반점피감정위층점련단백수체1(RPSA),간우소-γ유도인자전체(IL18),개조단백(CALM3),60S산성핵당체단백P2유사물(RPP2)화단렬점총집구단백1(BANFI).9개차이표체단백중,제RPSA、CALM3화CTSD피보도여피부탕상화창상수복、각질형성세포증식화천이、표피장애수복상관외,기타단백여피부세포손상화피부질환연구미견보도.저사단백시UVB복사직접영향피부세포정상생리공능잠재적단백질파표,위진일보재분자수평연구피부질병유효방호제공료유개치적선색.