广西植物
廣西植物
엄서식물
GUIHAIA
2011年
3期
388-392
,共5页
唐其%邱德有%马小军%莫长明%付伟
唐其%邱德有%馬小軍%莫長明%付偉
당기%구덕유%마소군%막장명%부위
罗汉果%甜苷V%抑制消减杂交%三萜皂苷%EST
囉漢果%甜苷V%抑製消減雜交%三萜皂苷%EST
라한과%첨감V%억제소감잡교%삼첩조감%EST
以罗汉果授粉后50 d和70 d果实为材料,利用抑制消减杂交技术构建了罗汉果果实在不同生育时期皂苷生物合成相关基因的差减cDNA文库.在正向差减文库(70 d为tester,50 d果实为driver)中随机挑选了641个cDNA阳性克隆测序,得到622条有效序列,重组率在96%以上.外源片段的长度分布在101～934 bp之间,平均长度约500 bp.BLASTN结果显示:201个ESTs序列没有同源序列,可能是新基因;另外421个ESTs序列在核酸数据库中存在同源序列,其序列和已知功能(主要是能量代谢、次生代谢、转录因子、衰老及抗病性等)的蛋白有高度相似性.构建的cDNA文库符合SSH文库的质量标准,能满足下一步的实验要求.该SSH-cDNA文库为研究罗汉果差异表达基因、探讨三萜皂苷生物合成的分子机理、提高罗汉果甜苷V的质量和产量奠定了基础.
以囉漢果授粉後50 d和70 d果實為材料,利用抑製消減雜交技術構建瞭囉漢果果實在不同生育時期皂苷生物閤成相關基因的差減cDNA文庫.在正嚮差減文庫(70 d為tester,50 d果實為driver)中隨機挑選瞭641箇cDNA暘性剋隆測序,得到622條有效序列,重組率在96%以上.外源片段的長度分佈在101～934 bp之間,平均長度約500 bp.BLASTN結果顯示:201箇ESTs序列沒有同源序列,可能是新基因;另外421箇ESTs序列在覈痠數據庫中存在同源序列,其序列和已知功能(主要是能量代謝、次生代謝、轉錄因子、衰老及抗病性等)的蛋白有高度相似性.構建的cDNA文庫符閤SSH文庫的質量標準,能滿足下一步的實驗要求.該SSH-cDNA文庫為研究囉漢果差異錶達基因、探討三萜皂苷生物閤成的分子機理、提高囉漢果甜苷V的質量和產量奠定瞭基礎.
이라한과수분후50 d화70 d과실위재료,이용억제소감잡교기술구건료라한과과실재불동생육시기조감생물합성상관기인적차감cDNA문고.재정향차감문고(70 d위tester,50 d과실위driver)중수궤도선료641개cDNA양성극륭측서,득도622조유효서렬,중조솔재96%이상.외원편단적장도분포재101～934 bp지간,평균장도약500 bp.BLASTN결과현시:201개ESTs서렬몰유동원서렬,가능시신기인;령외421개ESTs서렬재핵산수거고중존재동원서렬,기서렬화이지공능(주요시능량대사、차생대사、전록인자、쇠로급항병성등)적단백유고도상사성.구건적cDNA문고부합SSH문고적질량표준,능만족하일보적실험요구.해SSH-cDNA문고위연구라한과차이표체기인、탐토삼첩조감생물합성적분자궤리、제고라한과첨감V적질량화산량전정료기출.
