中华烧伤杂志
中華燒傷雜誌
중화소상잡지
16
2004年
2期
72-75
,共4页
瘢痕疙瘩%成纤维细胞%寡核苷酸类,反义%胶原%基因表达%结缔组织生长因子
瘢痕疙瘩%成纖維細胞%寡覈苷痠類,反義%膠原%基因錶達%結締組織生長因子
반흔흘탑%성섬유세포%과핵감산류,반의%효원%기인표체%결체조직생장인자
目的研究结缔组织生长因子(CTGF)在人瘢痕疙瘩发病机制中的作用.方法体外分离、培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF).在脂质体介导下,将异硫氰酸荧光素标记的硫代磷酸化CTGF反义寡核苷酸(ASODN)转染至HKF中,设为CTGF ASODN治疗组(AT组),同时设脂质体对照组(LC组,仅加入脂质体)和空白对照组(C组,不加脂质体和ASODN).于荧光显微镜下观察CTGF ASODN在各组细胞中的分布;通过逆转录聚合酶链式反应检测细胞中CTGF mRNA指数(RI);采用3H-脯氨酸掺入法检测细胞的胶原合成量.结果转染后12 h, AT组细胞胞浆内可见大量荧光,LC、C组HKF内无此现象.AT组转染后48 h RI值为0.12±0.62,明显低于LC组值0.51±0.18及C组值0.54±0.35 (P<0.01).AT组的3H-脯氨酸掺入率为108.96±79.05,较LC组值171.24±14.99及C组值165.38±43.61低 (P<0.01).结论CTGF ASODN能够抑制体外培养的HKF中CTGF基因表达和胶原合成,表明CTGF在人瘢痕疙瘩纤维化进程中发挥了一定作用.
目的研究結締組織生長因子(CTGF)在人瘢痕疙瘩髮病機製中的作用.方法體外分離、培養人瘢痕疙瘩成纖維細胞(HKF).在脂質體介導下,將異硫氰痠熒光素標記的硫代燐痠化CTGF反義寡覈苷痠(ASODN)轉染至HKF中,設為CTGF ASODN治療組(AT組),同時設脂質體對照組(LC組,僅加入脂質體)和空白對照組(C組,不加脂質體和ASODN).于熒光顯微鏡下觀察CTGF ASODN在各組細胞中的分佈;通過逆轉錄聚閤酶鏈式反應檢測細胞中CTGF mRNA指數(RI);採用3H-脯氨痠摻入法檢測細胞的膠原閤成量.結果轉染後12 h, AT組細胞胞漿內可見大量熒光,LC、C組HKF內無此現象.AT組轉染後48 h RI值為0.12±0.62,明顯低于LC組值0.51±0.18及C組值0.54±0.35 (P<0.01).AT組的3H-脯氨痠摻入率為108.96±79.05,較LC組值171.24±14.99及C組值165.38±43.61低 (P<0.01).結論CTGF ASODN能夠抑製體外培養的HKF中CTGF基因錶達和膠原閤成,錶明CTGF在人瘢痕疙瘩纖維化進程中髮揮瞭一定作用.
목적연구결체조직생장인자(CTGF)재인반흔흘탑발병궤제중적작용.방법체외분리、배양인반흔흘탑성섬유세포(HKF).재지질체개도하,장이류청산형광소표기적류대린산화CTGF반의과핵감산(ASODN)전염지HKF중,설위CTGF ASODN치료조(AT조),동시설지질체대조조(LC조,부가입지질체)화공백대조조(C조,불가지질체화ASODN).우형광현미경하관찰CTGF ASODN재각조세포중적분포;통과역전록취합매련식반응검측세포중CTGF mRNA지수(RI);채용3H-포안산참입법검측세포적효원합성량.결과전염후12 h, AT조세포포장내가견대량형광,LC、C조HKF내무차현상.AT조전염후48 h RI치위0.12±0.62,명현저우LC조치0.51±0.18급C조치0.54±0.35 (P<0.01).AT조적3H-포안산참입솔위108.96±79.05,교LC조치171.24±14.99급C조치165.38±43.61저 (P<0.01).결론CTGF ASODN능구억제체외배양적HKF중CTGF기인표체화효원합성,표명CTGF재인반흔흘탑섬유화진정중발휘료일정작용.
