CAJ | 학술논문

目的:探讨骨桥蛋白(OPN)反义基因对食管癌细胞增殖和转移的影响,为食管癌基因治疗提供理论依据.方法:PCR扩增获得人OPN基因,连接pcDNA3.1(+)载体,酶切、测序.脂质体介导将pcDNA3.1-ANOPN基因转入ECA 109,G418筛选获得稳定表达ANOPN基因的转染细胞ECA-ANOPN、表达空载体的ECA-vect细胞及空白对照ECA.RT-PCR检测ANOPN mRNA、免疫组织化学检测ANOPN基因蛋白表达.体外观察各组细胞生长速度、倍增时间,Transwell小室法检测细胞黏附、侵袭迁移能力的差异.结果:载体构建正确,测序结果与GenBank中公布的序列同源性为100%.与ECA-vect、ECA组比较,ECA-ANOPN细胞OPN的表达率明显降低(P<0.05),生长速度明显减慢(P<0.05),倍增时间增加(P<0.05),透膜细胞数明显降低(P<0.01).结论:ANOPN基因的稳定表达明显抑制ECA 109细胞的恶性表型.
목적:탐토골교단백(OPN)반의기인대식관암세포증식화전이적영향,위식관암기인치료제공이론의거.방법:PCR확증획득인OPN기인,련접pcDNA3.1(+)재체,매절、측서.지질체개도장pcDNA3.1-ANOPN기인전입ECA 109,G418사선획득은정표체ANOPN기인적전염세포ECA-ANOPN、표체공재체적ECA-vect세포급공백대조ECA.RT-PCR검측ANOPN mRNA、면역조직화학검측ANOPN기인단백표체.체외관찰각조세포생장속도、배증시간,Transwell소실법검측세포점부、침습천이능력적차이.결과:재체구건정학,측서결과여GenBank중공포적서렬동원성위100%.여ECA-vect、ECA조비교,ECA-ANOPN세포OPN적표체솔명현강저(P<0.05),생장속도명현감만(P<0.05),배증시간증가(P<0.05),투막세포수명현강저(P<0.01).결론:ANOPN기인적은정표체명현억제ECA 109세포적악성표형.