吉林农业大学学报
吉林農業大學學報
길임농업대학학보
JOURNAL OF JILIN AGRICUL TURAL UNIVERSITY
2011年
5期
571-575
,共5页
任保彦%陈玉兰%官鹏涛%李建华%杨举%张西臣
任保彥%陳玉蘭%官鵬濤%李建華%楊舉%張西臣
임보언%진옥란%관붕도%리건화%양거%장서신
微小隐孢子虫%黏附相关蛋白%CP21重组蛋白%免疫特性
微小隱孢子蟲%黏附相關蛋白%CP21重組蛋白%免疫特性
미소은포자충%점부상관단백%CP21중조단백%면역특성
采用微小隐孢子虫CP21基因的原核表达蛋白的抗血清对微小隐孢子虫感染HCT-8细胞进行了体外阻断试验,检测不同浓度抗血清对HCT-8细胞感染隐孢子虫感染率的影响.同时应用纯化的重组CP21蛋白对小鼠进行免疫,检测体液免疫水平和细胞免疫水平的变化.对免疫后的小鼠接种微小隐孢子虫,检测重组CP21蛋白对微小隐孢子虫感染的保护效果.体外阻断试验结果显示,在培养基中分别加入1%、2%、5%和10%的抗重组CP21蛋白鼠血清时,HCT-8细胞感染隐孢子虫的平均感染率由82.0%分别下降到41.1%、35.2%、30.6%和23.5%；动物保护性试验体液免疫水平检测发现,试验组血清中IgG滴度随免疫次数增加而逐渐升高,第3次免疫后IgG滴度与对照组相比差异均极显著(P＜0.01)；细胞免疫水平检测证明CI4+/CD8+T淋巴细胞数值与对照组相比差异均极显著(P＜0.01)；攻虫保护试验结果表明试验组与对照组相比卵囊排出量显著减少(P＜0.05),卵囊排出持续时间平均缩短4d,减虫率达38%.体内外试验结果表明:CP21基因可用于作为预防和治疗隐孢子虫病的有效靶位点基因.
採用微小隱孢子蟲CP21基因的原覈錶達蛋白的抗血清對微小隱孢子蟲感染HCT-8細胞進行瞭體外阻斷試驗,檢測不同濃度抗血清對HCT-8細胞感染隱孢子蟲感染率的影響.同時應用純化的重組CP21蛋白對小鼠進行免疫,檢測體液免疫水平和細胞免疫水平的變化.對免疫後的小鼠接種微小隱孢子蟲,檢測重組CP21蛋白對微小隱孢子蟲感染的保護效果.體外阻斷試驗結果顯示,在培養基中分彆加入1%、2%、5%和10%的抗重組CP21蛋白鼠血清時,HCT-8細胞感染隱孢子蟲的平均感染率由82.0%分彆下降到41.1%、35.2%、30.6%和23.5%；動物保護性試驗體液免疫水平檢測髮現,試驗組血清中IgG滴度隨免疫次數增加而逐漸升高,第3次免疫後IgG滴度與對照組相比差異均極顯著(P＜0.01)；細胞免疫水平檢測證明CI4+/CD8+T淋巴細胞數值與對照組相比差異均極顯著(P＜0.01)；攻蟲保護試驗結果錶明試驗組與對照組相比卵囊排齣量顯著減少(P＜0.05),卵囊排齣持續時間平均縮短4d,減蟲率達38%.體內外試驗結果錶明:CP21基因可用于作為預防和治療隱孢子蟲病的有效靶位點基因.
채용미소은포자충CP21기인적원핵표체단백적항혈청대미소은포자충감염HCT-8세포진행료체외조단시험,검측불동농도항혈청대HCT-8세포감염은포자충감염솔적영향.동시응용순화적중조CP21단백대소서진행면역,검측체액면역수평화세포면역수평적변화.대면역후적소서접충미소은포자충,검측중조CP21단백대미소은포자충감염적보호효과.체외조단시험결과현시,재배양기중분별가입1%、2%、5%화10%적항중조CP21단백서혈청시,HCT-8세포감염은포자충적평균감염솔유82.0%분별하강도41.1%、35.2%、30.6%화23.5%；동물보호성시험체액면역수평검측발현,시험조혈청중IgG적도수면역차수증가이축점승고,제3차면역후IgG적도여대조조상비차이균겁현저(P＜0.01)；세포면역수평검측증명CI4+/CD8+T림파세포수치여대조조상비차이균겁현저(P＜0.01)；공충보호시험결과표명시험조여대조조상비란낭배출량현저감소(P＜0.05),란낭배출지속시간평균축단4d,감충솔체38%.체내외시험결과표명:CP21기인가용우작위예방화치료은포자충병적유효파위점기인.
