农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2012年
1期
30-37
,共8页
OsbHLH1基因%Bar基因%水稻%耐低温%抗除草剂
OsbHLH1基因%Bar基因%水稻%耐低溫%抗除草劑
OsbHLH1기인%Bar기인%수도%내저온%항제초제
OsbHLH1基因编码bHLH(basic helix-loop-helix,碱性螺旋-环-螺旋)类转录因子,与水稻耐低温相关.草铵膦是一种高效低毒灭生性除草剂,Bar基因表达产物能解除草铵膦的毒性.本实验对通过农杆菌(A grobacterium tumefaciens)浸染法获得的以粳型水稻(Oryza sativaL.subsp.japonica Kato)恢复系淮C17为受体的转OsbHLH1和Bar基因水稻进行研究,鉴定其除草剂抗性和耐低温能力,考查其农艺性状.草铵膦筛选发现Bar基因正常表达;对草铵膦筛选获得的转基因植株进行PCR、Southern、RT-PCR和实时荧光定量PCR检测,发现OsbHLH1基因已经整合到水稻基因组中并且在水稻中表达.转基因T3代株系芽期(萌发芽长0.5 mm)在2℃条件下处理6d,第6号转基因株系死苗率为17.8%,对照死苗率为61.1%.T3代苗期(一叶一心)在8~10℃下处理7d,第5、6、9、11号株系的根长显著长于对照,第3、5、11号株系的根数显著多于对照,第3号株系的平均鲜重显著重于对照.芽期、苗期耐冷性试验表明,OsbHLH1基因在水稻中过量表达显著提高了水稻芽期、苗期的耐低温能力.对转基因T2代的农艺性状进行考查,株高、千粒重、结实率、理论产量等农艺性状与对照相比较均出现了显著的变化,外源基因的导入对水稻的农艺性状有明显影响.研究结果将为选育抗除草剂、耐低温杂交粳稻新组合提供新种质.
OsbHLH1基因編碼bHLH(basic helix-loop-helix,堿性螺鏇-環-螺鏇)類轉錄因子,與水稻耐低溫相關.草銨膦是一種高效低毒滅生性除草劑,Bar基因錶達產物能解除草銨膦的毒性.本實驗對通過農桿菌(A grobacterium tumefaciens)浸染法穫得的以粳型水稻(Oryza sativaL.subsp.japonica Kato)恢複繫淮C17為受體的轉OsbHLH1和Bar基因水稻進行研究,鑒定其除草劑抗性和耐低溫能力,攷查其農藝性狀.草銨膦篩選髮現Bar基因正常錶達;對草銨膦篩選穫得的轉基因植株進行PCR、Southern、RT-PCR和實時熒光定量PCR檢測,髮現OsbHLH1基因已經整閤到水稻基因組中併且在水稻中錶達.轉基因T3代株繫芽期(萌髮芽長0.5 mm)在2℃條件下處理6d,第6號轉基因株繫死苗率為17.8%,對照死苗率為61.1%.T3代苗期(一葉一心)在8~10℃下處理7d,第5、6、9、11號株繫的根長顯著長于對照,第3、5、11號株繫的根數顯著多于對照,第3號株繫的平均鮮重顯著重于對照.芽期、苗期耐冷性試驗錶明,OsbHLH1基因在水稻中過量錶達顯著提高瞭水稻芽期、苗期的耐低溫能力.對轉基因T2代的農藝性狀進行攷查,株高、韆粒重、結實率、理論產量等農藝性狀與對照相比較均齣現瞭顯著的變化,外源基因的導入對水稻的農藝性狀有明顯影響.研究結果將為選育抗除草劑、耐低溫雜交粳稻新組閤提供新種質.
OsbHLH1기인편마bHLH(basic helix-loop-helix,감성라선-배-라선)류전록인자,여수도내저온상관.초안련시일충고효저독멸생성제초제,Bar기인표체산물능해제초안련적독성.본실험대통과농간균(A grobacterium tumefaciens)침염법획득적이갱형수도(Oryza sativaL.subsp.japonica Kato)회복계회C17위수체적전OsbHLH1화Bar기인수도진행연구,감정기제초제항성화내저온능력,고사기농예성상.초안련사선발현Bar기인정상표체;대초안련사선획득적전기인식주진행PCR、Southern、RT-PCR화실시형광정량PCR검측,발현OsbHLH1기인이경정합도수도기인조중병차재수도중표체.전기인T3대주계아기(맹발아장0.5 mm)재2℃조건하처리6d,제6호전기인주계사묘솔위17.8%,대조사묘솔위61.1%.T3대묘기(일협일심)재8~10℃하처리7d,제5、6、9、11호주계적근장현저장우대조,제3、5、11호주계적근수현저다우대조,제3호주계적평균선중현저중우대조.아기、묘기내랭성시험표명,OsbHLH1기인재수도중과량표체현저제고료수도아기、묘기적내저온능력.대전기인T2대적농예성상진행고사,주고、천립중、결실솔、이론산량등농예성상여대조상비교균출현료현저적변화,외원기인적도입대수도적농예성상유명현영향.연구결과장위선육항제초제、내저온잡교갱도신조합제공신충질.