武汉大学学报（理学版）
武漢大學學報（理學版）
무한대학학보（이학판）
JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
6期
739-744
,共6页
付百玲%徐进平%孟小林%王健%鲁伟
付百玲%徐進平%孟小林%王健%魯偉
부백령%서진평%맹소림%왕건%로위
对虾%原核表达%抗菌活性
對蝦%原覈錶達%抗菌活性
대하%원핵표체%항균활성
采集南美白对虾血淋巴,从血细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增编码penaeidin-2成熟肽的开放阅读框cDNA序列,将其克隆至pGEM-T载体,进行序列测定,然后克隆至pET-32a(+)表达载体中,在E.coli Origami B(DE3)pLysS 中表达含6个His的重组对虾肽融合蛋白Pen-24,通过His Band resin Ni2+层析柱纯化获得Pen-24蛋白,采用纸片扩散法和液体生长抑制法检测该蛋白的抑菌活性.经SDS-PAGE分析,Pen-24蛋白的分子量为24.1×103.1 μg对虾肽融合蛋白Pen-24与5 U的氨苄青霉素活性相当,对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和抗氨苄青霉素大肠杆菌均具有抑菌活性.
採集南美白對蝦血淋巴,從血細胞中提取總RNA,經RT-PCR擴增編碼penaeidin-2成熟肽的開放閱讀框cDNA序列,將其剋隆至pGEM-T載體,進行序列測定,然後剋隆至pET-32a(+)錶達載體中,在E.coli Origami B(DE3)pLysS 中錶達含6箇His的重組對蝦肽融閤蛋白Pen-24,通過His Band resin Ni2+層析柱純化穫得Pen-24蛋白,採用紙片擴散法和液體生長抑製法檢測該蛋白的抑菌活性.經SDS-PAGE分析,Pen-24蛋白的分子量為24.1×103.1 μg對蝦肽融閤蛋白Pen-24與5 U的氨芐青黴素活性相噹,對革蘭氏暘性細菌、革蘭氏陰性細菌和抗氨芐青黴素大腸桿菌均具有抑菌活性.
채집남미백대하혈림파,종혈세포중제취총RNA,경RT-PCR확증편마penaeidin-2성숙태적개방열독광cDNA서렬,장기극륭지pGEM-T재체,진행서렬측정,연후극륭지pET-32a(+)표체재체중,재E.coli Origami B(DE3)pLysS 중표체함6개His적중조대하태융합단백Pen-24,통과His Band resin Ni2+층석주순화획득Pen-24단백,채용지편확산법화액체생장억제법검측해단백적억균활성.경SDS-PAGE분석,Pen-24단백적분자량위24.1×103.1 μg대하태융합단백Pen-24여5 U적안변청매소활성상당,대혁란씨양성세균、혁란씨음성세균화항안변청매소대장간균균구유억균활성.
