安徽农业大学学报
安徽農業大學學報
안휘농업대학학보
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL UNIVERSITY
2008年
2期
234-238
,共5页
刘守安%韩宝瑜%付建玉%秦华光
劉守安%韓寶瑜%付建玉%秦華光
류수안%한보유%부건옥%진화광
超氧化物歧化酶%茶树嫩叶%原核表达
超氧化物歧化酶%茶樹嫩葉%原覈錶達
초양화물기화매%다수눈협%원핵표체
聚合酶链式反应(PCR)扩增茶树嫩叶锰超氧化物歧化酶基因,并与原核表达载体pET22b(+)连接,构建重组质粒pET/msod,将该质粒转化至大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),获得转基因工程菌BL21-pET/msod.在1 mmol·L-1异丙基硫代-β-半乳糖苷(IPTG)诱导下,重组蛋白得到高效表达,酶活性可达2×105U·L-1.SDS-PAGE检测表达蛋白分子量为25 kD,与通过核苷酸推测的分子量一致.
聚閤酶鏈式反應(PCR)擴增茶樹嫩葉錳超氧化物歧化酶基因,併與原覈錶達載體pET22b(+)連接,構建重組質粒pET/msod,將該質粒轉化至大腸桿菌Escherichia coli BL21(DE3),穫得轉基因工程菌BL21-pET/msod.在1 mmol·L-1異丙基硫代-β-半乳糖苷(IPTG)誘導下,重組蛋白得到高效錶達,酶活性可達2×105U·L-1.SDS-PAGE檢測錶達蛋白分子量為25 kD,與通過覈苷痠推測的分子量一緻.
취합매련식반응(PCR)확증다수눈협맹초양화물기화매기인,병여원핵표체재체pET22b(+)련접,구건중조질립pET/msod,장해질립전화지대장간균Escherichia coli BL21(DE3),획득전기인공정균BL21-pET/msod.재1 mmol·L-1이병기류대-β-반유당감(IPTG)유도하,중조단백득도고효표체,매활성가체2×105U·L-1.SDS-PAGE검측표체단백분자량위25 kD,여통과핵감산추측적분자량일치.
