CAJ | 학술논문

大菱鲆红体病虹彩病毒(Turbot reddish body iridovirus,TRBIV)可引起大菱鲆病毒性红体病(viral reddish body syn-drome,VRBS)并导致养殖大菱鲆(Scophthalmus maximus)大量死亡.研究利用TRBIV主要衣壳蛋白基因序列设计的1对引物,结合内嵌式核酸染料SYBR Green Ⅰ,建立了TRBIV特异的Real-time PCR检测方法.以10倍梯度稀释的含有TRBIV目的扩增片段的质粒作为标准,进行Real-time PCR反应以确定检测灵敏度.制备标准曲线.结果表明,该对引物具有较高的灵敏度和较强的特异性,能够检测相当于102数量级的TRBIV基因组拷贝,而不与健康大菱鲆组织DNA、淋巴囊肿病毒DNA发生交叉反应.应用建立的Real-time PCR检测方法,对TRBIV的组织敏感性检测和病毒流行情况调查.结果发现,大菱鲆的脾脏、肾脏、脑、鳃、心脏、肝脏、消化道、血液等组织中均可检测到TRBIV的存在,其中脾和肾是TRBIV的最主要的靶器官,每毫克组织的病毒含量分别高达5.23×106和2.18×106个.分子流行病学调查结果显示,山东半岛的多个大菱鲆养殖场中均存在TRBIV的感染和流行,感染鱼每毫克脾组织的病毒含量在1.27×102～2.33×106之间.研究建立了TRBIV Real-time PCR检测方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,TRBIV的快速检测具有应用前景.
대릉평홍체병홍채병독(Turbot reddish body iridovirus,TRBIV)가인기대릉평병독성홍체병(viral reddish body syn-drome,VRBS)병도치양식대릉평(Scophthalmus maximus)대량사망.연구이용TRBIV주요의각단백기인서렬설계적1대인물,결합내감식핵산염료SYBR Green Ⅰ,건립료TRBIV특이적Real-time PCR검측방법.이10배제도희석적함유TRBIV목적확증편단적질립작위표준,진행Real-time PCR반응이학정검측령민도.제비표준곡선.결과표명,해대인물구유교고적령민도화교강적특이성,능구검측상당우102수량급적TRBIV기인조고패,이불여건강대릉평조직DNA、림파낭종병독DNA발생교차반응.응용건립적Real-time PCR검측방법,대TRBIV적조직민감성검측화병독류행정황조사.결과발현,대릉평적비장、신장、뇌、새、심장、간장、소화도、혈액등조직중균가검측도TRBIV적존재,기중비화신시TRBIV적최주요적파기관,매호극조직적병독함량분별고체5.23×106화2.18×106개.분자류행병학조사결과현시,산동반도적다개대릉평양식장중균존재TRBIV적감염화류행,감염어매호극비조직적병독함량재1.27×102～2.33×106지간.연구건립료TRBIV Real-time PCR검측방법,령민도고,특이성호,가이진행정량분석,TRBIV적쾌속검측구유응용전경.